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ES-2
Tecido
Ovário
Doença
Adenocarcinoma de células claras do ovário
Sinónimos
ES2

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ES-2

Cell line · Número do produto 305038

The ES-2 cell line is derived from a poorly differentiated ovarian clear cell carcinoma, offering a unique in vitro model to study the biological behavior...

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Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha de células ES-2 é derivada de um carcinoma de células claras do ovário pouco diferenciado, oferecendo um modelo in vitro único para estudar os comportamentos biológicos e as respostas ao tratamento deste subtipo agressivo de cancro. Originalmente cultivadas em ágar mole, um método que favorece o crescimento das células cancerosas e suprime o crescimento dos fibroblastos, as células ES-2 constituem um sistema robusto para analisar as interações entre as células tumorais e os mecanismos de resistência aos medicamentos numa matriz tridimensional que imita de perto o ambiente in vivo.

Farmacologicamente, as células ES-2 apresentam resistência baixa a moderada a vários agentes quimioterápicos, incluindo doxorrubicina, cisplatina, carmustina, etoposídeo e cianomorfolinodoxorrubicina (MRA-CN). Este perfil de resistência faz do ES-2 uma ferramenta essencial para a investigação oncológica, particularmente no desenvolvimento e teste de novos regimes quimioterapêuticos e terapias combinadas. Além disso, a expressão da glicoproteína-P nas células ES-2 é baixa, o que é significativo, uma vez que a glicoproteína-P está frequentemente implicada no efluxo de fármacos das células cancerosas, contribuindo para a multirresistência. O estudo das células ES-2 pode, por conseguinte, fornecer informações sobre como ultrapassar a resistência aos medicamentos nos carcinomas de células claras do ovário.

Tecido
Ovário
Doença
Adenocarcinoma de células claras do ovário
Sinónimos
  • ES2

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Fibroblastos
Tumorigénico
Sim

04Identificadores

Referência
ES-2 (número de catálogo da Cytion 305038)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3509

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
P Glicoproteína

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
McCoys 5a, com: 3,0 g/L de glucose, com: glutamina estável, com: 2,0 mM de piruvato de sódio, com: 2,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820200a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
47 anos
Etnia
Europeu