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MKN-7
Tessuto
Stomaco
Malattia
Adenocarcinoma tubulare gastrico
Sito metastatico
Linfonodo
Sinonimi
MKN-7, MKN 7

Documenti

MKN-7

Cell line · Codice prodotto 305104

The MKN-7 cell line is a well-characterized human gastric carcinoma cell line, established from a well-differentiated tubular adenocarcinoma. This cell li...

€800.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare MKN-7 è una linea cellulare di carcinoma gastrico umano ben caratterizzata, ottenuta da un adenocarcinoma tubulare ben differenziato. Questa linea cellulare fa parte di un pannello più ampio di linee cellulari di cancro gastrico sviluppate per studiare i diversi comportamenti istologici e biologici dei carcinomi gastrici. Le cellule MKN-7 sono note per mostrare caratteristiche morfologiche indicative della differenziazione intestinale, come la polarità cellulare e la presenza di microvilli con filamenti centrali. Queste caratteristiche sono tipicamente osservate sia nelle colture in vitro che negli xenotrapianti in topi nudi, sebbene il grado di differenziazione possa diminuire nel tempo con condizioni di coltura prolungate.

In termini di caratteristiche funzionali, le cellule MKN-7 mostrano una bassa attività fibrinolitica, che è principalmente plasminogeno-dipendente. Questa attività è significativamente inferiore rispetto ad altre linee cellulari di cancro gastrico come MKN-1 e MKN-28, che mostrano attività fibrinolitiche più elevate. La bassa attività fibrinolitica delle cellule MKN-7 può essere rilevante negli studi che indagano il ruolo della fibrinolisi nella progressione del cancro, in particolare in relazione al potenziale invasivo e metastatico dei tumori gastrici. Inoltre, la linea cellulare MKN-7, insieme ad altre linee cellulari di cancro gastrico, è stata utilizzata in studi che hanno esaminato l'attività tromboplastica, sebbene MKN-7 sia nota per i suoi livelli relativamente bassi di questa attività. Ciò suggerisce un ruolo più limitato negli stati di ipercoagulazione spesso associati a fenotipi tumorali aggressivi.

Tessuto
Stomaco
Malattia
Adenocarcinoma tubulare gastrico
Sito metastatico
Linfonodo
Sinonimi
  • MKN-7
  • MKN 7

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MKN-7 (numero di catalogo Cytion 305104)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1417

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
39 anni
Etnia
Asiatico