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SNU-761
Tessuto
Fegato
Malattia
carcinoma epatocellulare
Sinonimi
SNU761, NCI-SNU-761

Documenti

SNU-761

Cell line · Codice prodotto 305637

The SNU-761 cell line is a human hepatocellular carcinoma (HCC) model derived from an adult patient. As part of the Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) a...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare SNU-761 è un modello di carcinoma epatocellulare umano (HCC) derivato da un paziente adulto. Nell'ambito delle iniziative Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) e LIMORE (Liver Cancer Model Repository), la linea SNU-761 è stata ampiamente caratterizzata a diversi livelli molecolari. La linea cellulare è stata utilizzata per esplorare l'eterogeneità genetica e trascrittomica tipica dei tumori primari del fegato, compresi quelli associati all'infezione da virus dell'epatite B (HBV), prevalente in molti casi di HCC nell'Asia orientale. La profilazione genomica ha rivelato che i modelli LIMORE come SNU-761 spesso conservano il panorama delle mutazioni e delle alterazioni del numero di copie dei tumori primari, comprese le alterazioni in fattori oncogenici chiave come TP53, CTNNB1 e FGF19.

SNU-761 e altri modelli di cancro al fegato della collezione LIMORE sono stati sottoposti a screening ad alta produttività della sensibilità ai farmaci su un ampio pannello di chemioterapici e agenti mirati. Questi set di dati farmacogenomici hanno permesso ai ricercatori di identificare potenziali biomarcatori predittivi della risposta, come le associazioni gene-farmaco e le letalità sintetiche rilevanti per le mutazioni comuni nel cancro al fegato. Inoltre, i confronti tra dati trascrittomici ed epigenetici — quali la metilazione del DNA e i modelli di modificazione degli istoni — hanno aiutato a classificare SNU-761 all’interno dei sottotipi di cancro al fegato e a valutarne gli attributi funzionali, tra cui l’invasività e la risposta agli inibitori specifici per i percorsi. Questa profilazione estesa rende SNU-761 un modello prezioso per lo studio dell’HCC correlato all’HBV e per la valutazione di strategie terapeutiche personalizzate.

Tessuto
Fegato
Malattia
carcinoma epatocellulare
Sinonimi
  • SNU761
  • NCI-SNU-761

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Poligonale
Tipo di cellula
Epiteliale
Tempo di raddoppio
24 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SNU-761 (codice catalogo Cytion 305637)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5089

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: TP53, semplice, p.Ser313Glyfs*13 (c.937_968delAGCTCCTCTCCCCAGCCAAAGAAGAAACCACT), non specificata

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente, aggiungere 2,5 g/L di glucosio e 10 mM di HEPES
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il terreno di coltura, aggiungere una soluzione fresca di tripsina allo 0,25% e di EDTA allo 0,02%, tenere la fiasca di coltura a 37''''C per 3-5 minuti, aggiungere il terreno di coltura e raccogliere le cellule, trasferire il terreno di coltura in una provetta da 15 ml, centrifugare, aspirare il terreno di coltura, risospendere il pellet con il terreno di coltura e versarlo nella fiasca di coltura
Densità di semina
Da 1 a 3 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
49 anni
Etnia
Coreano