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SNU-449
Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare adulto
Sinonimi
SNU449, NCI-SNU-449

Documenti

SNU-449

Cell line · Codice prodotto 305429

SNU-449 is a human hepatocellular carcinoma (HCC) cell line widely used in research to study liver cancer biology, drug resistance, apoptosis, and novel t...

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01Informazioni generali

Descrizione

SNU-449 è una linea cellulare di carcinoma epatocellulare umano (HCC) ampiamente utilizzata nella ricerca per studiare la biologia del cancro al fegato, la resistenza ai farmaci, l'apoptosi e le nuove strategie terapeutiche. Poiché il carcinoma epatocellulare è uno dei tumori maligni del fegato più aggressivi e comuni con prognosi infausta, linee cellulari come SNU-449 sono fondamentali per comprendere i meccanismi molecolari alla base della progressione del tumore e della risposta ai farmaci.

SNU-449 si è rivelata particolarmente utile negli studi sull'apoptosi e sulla ferroptosi, una forma regolata di morte cellulare associata alla perossidazione lipidica ferro-dipendente. Ad esempio, la ricerca ha dimostrato che agenti come il sorafenib, un trattamento standard per l'HCC avanzato, e l'artesunato sinergizzano per indurre la ferroptosi nelle cellule di SNU-449. Questa combinazione esacerba la perossidazione lipidica e lo stress ossidativo, portando alla morte estesa delle cellule tumorali. Questa sinergia si verifica perché l'artesunato promuove la degradazione lisosomiale della ferritina (ferritinofagia), che aumenta la disponibilità di ferro libero, mentre il sorafenib compromette la funzione mitocondriale e impoverisce il glutatione, un antiossidante critico.

SNU-449 è stato utilizzato anche per esplorare le vie apoptotiche nel cancro del fegato. Ad esempio, la genisteina, un isoflavone naturale, induce l'apoptosi nelle cellule SNU-449 attraverso la down-regolazione della tioredoxina-1 (Trx1), una proteina antiossidante che regola le specie reattive dell'ossigeno (ROS) e inibisce l'apoptosi. Il trattamento con genisteina aumenta i livelli di ROS e attiva le vie legate all'apoptosi, tra cui l'attivazione della caspasi-3 e la frammentazione del DNA. Questi risultati evidenziano che SNU-449 è un modello prezioso per studiare sia l'apoptosi che la ferroptosi, favorendo lo sviluppo di terapie mirate per il carcinoma epatocellulare.

Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare adulto
Sinonimi
  • SNU449
  • NCI-SNU-449

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SNU-449 (numero di catalogo Cytion 305429)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0454

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: ARID1A, p.Glu2250Argfs*28 (c.6747dupA); Mutazione: AXIN1, p.Arg712Ter (c.2134C>T), omozigote; Mutazione: TP53, p.Lys139Arg (c.416A>G); Mutazione: TP53, p.Ala161Thr (c.481G>A), omozigote
Virus
HBV

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente, aggiungere 2,5 g/L di glucosio e 25 mM di HEPES
Reagente di dissociazione
Accutase
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
52 anni
Etnia
Coreano