Pereiti prie turinio
C127I
Audinys
Krūtys, pieno liauka
Liga
Karcinoma
Sinonimai
C 1271, C-127I, C-127 I, CNC 127I

Dokumentai

C127I

Cell line · Prekės numeris 400134

The C127I cell line is a murine mammary gland epithelial cell line, commonly used in biomedical research for its ability to synthesize and secrete recombi...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

C127I ląstelių linija yra pelės pieno liaukos epitelio ląstelių linija, paprastai naudojama biomedicininiuose tyrimuose dėl gebėjimo sintetinti ir išskirti rekombinantinius baltymus. Šios ląstelės yra kilusios iš BALB/c pelės pieno liaukos ir ypač išsiskiria epitelio morfologija bei reakcija į hormonus ir kitus augimo veiksnius. C127I ląstelių linija buvo labai svarbi tiriant genų raišką, signalų perdavimo kelius, susijusius su vėžio vystymusi, ir gaminant virusinius vektorius genų terapijai.

Viena iš svarbiausių C127I ląstelių linijos savybių yra tai, kad ją galima lengvai transfekuoti, todėl ji yra vertinga priemonė rekombinantinių baltymų gamybai ir genų redagavimo tyrimams. Ji palaiko įvairių pelėsinių retrovirusų replikaciją, palengvindama stabilių rekombinantinių linijų, išreiškiančių pageidaujamus genus, gamybą. Dėl šios savybės C127I ląstelės tapo ypač naudingos molekulinės biologijos ir genetikos srityse, kur jos dažnai naudojamos siekiant ištirti genų perteklinės ekspresijos ar nušalinimo poveikį kontroliuojamoje aplinkoje.

Audinys
Krūtys, pieno liauka
Liga
Karcinoma
Paraiškos
Transfekcijos šeimininkas, skirtas transformuoti galvijų papilomos viruso DNR plazmidėmis. Sarkomos viruso sukeltų židinių vizualizavimas. Kiekybiniai galvijų papilomos viruso tyrimai in vitro.
Sinonimai
  • C 1271
  • C-127I
  • C-127 I
  • CNC 127I

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This murine breast carcinoma cell line (C127I) contains recombinant viral sequences encoding T7 RNA polymerase and CFTR delivered via infection with engineered viruses, functioning as a transfection host. The construct is stably integrated into C127 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus

04Identifikatoriai

Nuoroda
C127I (Cytion katalogo numeris 400134)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_3882

05Išraiška ir jautrumas

Virusai
Neigiamas ektromelijos virusas (pelių raupai).
Jautrumas virusams
Galvijų papilomos virusas
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas (nustatyta supernatantiniame skystyje)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
RIII