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C127I
Tessuto
Seno, ghiandola mammaria
Malattia
Carcinoma
Sinonimi
C 1271, C-127I, C-127 I, CNC 127I

Documenti

C127I

Cell line · Codice prodotto 400134

The C127I cell line is a murine mammary gland epithelial cell line, commonly used in biomedical research for its ability to synthesize and secrete recombi...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare C127I è una linea cellulare epiteliale della ghiandola mammaria murina, comunemente utilizzata nella ricerca biomedica per la sua capacità di sintetizzare e secernere proteine ricombinanti. Queste cellule provengono dalla ghiandola mammaria del topo BALB/c e sono particolarmente note per la loro morfologia epiteliale e la reattività agli ormoni e ad altri fattori di crescita. La linea cellulare C127I è stata fondamentale per lo studio dell'espressione genica, delle vie di trasduzione del segnale legate allo sviluppo del cancro e per la produzione di vettori virali per la terapia genica.

Una delle caratteristiche principali della linea cellulare C127I è la sua capacità di essere facilmente trasfettata, che la rende uno strumento prezioso per la produzione di proteine ricombinanti e per gli studi di editing genico. Supporta la replicazione di vari retrovirus murini, facilitando la produzione di linee ricombinanti stabili che esprimono geni desiderati. Questa caratteristica ha reso le cellule C127I particolarmente utili nei campi della biologia molecolare e della genetica, dove vengono spesso impiegate per esplorare gli effetti della sovraespressione o del knockdown genico in un ambiente controllato.

Tessuto
Seno, ghiandola mammaria
Malattia
Carcinoma
Applicazioni
Ospite di trasfezione per la trasformazione con plasmidi di DNA del papilloma virus bovino. Visualizzazione dei foci indotti dal virus del sarcoma. Saggi quantitativi in vitro per il papilloma virus bovino.
Sinonimi
  • C 1271
  • C-127I
  • C-127 I
  • CNC 127I

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This murine breast carcinoma cell line (C127I) contains recombinant viral sequences encoding T7 RNA polymerase and CFTR delivered via infection with engineered viruses, functioning as a transfection host. The construct is stably integrated into C127 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
C127I (numero di catalogo Cytion 400134)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_3882

05Espressione e suscettibilità

Virus
Negativo per il virus dell'ectromelia (vaiolo dei topi).
Suscettibilità ai virus
Papilloma virus bovino
Trascriptasi inversa
Negativo (come determinato nel liquido surnatante)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
RIII