Siirry sisältöön
C127I
Kudos
Rinta, rintarauhanen
Sairaus
Syöpä
Synonyymit
C 1271, C-127I, C-127 I, CNC 127I

Asiakirjat

C127I

Cell line · Tuotenumero 400134

The C127I cell line is a murine mammary gland epithelial cell line, commonly used in biomedical research for its ability to synthesize and secrete recombi...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

C127I-solulinja on hiiren maitorauhasen epiteelisolulinja, jota käytetään yleisesti biolääketieteellisessä tutkimuksessa sen kyvyn vuoksi syntetisoida ja erittää rekombinanttiproteiineja. Nämä solut ovat peräisin BALB/c-hiiren rintarauhasesta, ja ne tunnetaan erityisesti niiden epiteelimorfologiasta ja herkkyydestä hormoneille ja muille kasvutekijöille. C127I-solulinjalla on ollut tärkeä merkitys geeniekspression ja syövän kehittymiseen liittyvien signaalinvälitysreittien tutkimisessa sekä geeniterapiaan tarkoitettujen virusvektoreiden tuottamisessa.

Yksi C127I-solulinjan tärkeimmistä ominaisuuksista on sen kyky olla helposti transfektoitavissa, mikä tekee siitä arvokkaan välineen rekombinanttiproteiinien tuotantoon ja geenieditointitutkimuksiin. Se tukee erilaisten hiiren retrovirusten replikaatiota, mikä helpottaa haluttuja geenejä ilmentävien stabiilien rekombinantti-linjojen tuotantoa. Tämä ominaisuus on tehnyt C127I-soluista erityisen käyttökelpoisia molekyylibiologian ja genetiikan aloilla, joilla niitä käytetään usein geenien yli- tai aliekspression vaikutusten tutkimiseen kontrolloidussa ympäristössä.

Kudos
Rinta, rintarauhanen
Sairaus
Syöpä
Sovellukset
Transfektio-isäntä naudan papilloomaviruksen DNA-plasmidien transformaatiota varten. Sarkoomaviruksen aiheuttamien pesäkkeiden visualisointi. Nautojen papilloomaviruksen kvantitatiiviset in vitro -määritykset.
Synonyymit
  • C 1271
  • C-127I
  • C-127 I
  • CNC 127I

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This murine breast carcinoma cell line (C127I) contains recombinant viral sequences encoding T7 RNA polymerase and CFTR delivered via infection with engineered viruses, functioning as a transfection host. The construct is stably integrated into C127 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen

04Tunnisteet

Lähdeviite
C127I (Cytionin luettelonumero 400134)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_3882

05Ilmentyminen ja alttius

Virukset
Negatiivinen ektromelia-virukselle (hiiren rokolle).
Viruksille altistuminen
Naudan papilloomavirus
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen (supernatantinesteestä määritettynä)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
RIII