Pāriet uz saturu
C127I
Audums
Krūtis, piena dziedzeris
Slimība
Karcinoma
Sinonīmi
C 1271, C-127I, C-127 I, CNC 127I

Dokumenti

C127I

Cell line · Preces numurs 400134

The C127I cell line is a murine mammary gland epithelial cell line, commonly used in biomedical research for its ability to synthesize and secrete recombi...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

C127I šūnu līnija ir peļu piena dziedzera epitēlija šūnu līnija, ko parasti izmanto biomedicīnas pētījumos, jo tā spēj sintezēt un izdalīt rekombinantus proteīnus. Šīs šūnas ir iegūtas no peles BALB/c piena dziedzera, un tās īpaši izceļas ar epitēlija morfoloģiju un spēju reaģēt uz hormoniem un citiem augšanas faktoriem. C127I šūnu līnija ir palīdzējusi pētīt gēnu ekspresiju, signālu pārneses ceļus, kas saistīti ar vēža attīstību, un gēnu terapijai paredzēto vīrusu vektoru ražošanu.

Viena no galvenajām C127I šūnu līnijas īpašībām ir tās spēja viegli transficēties, padarot to par vērtīgu līdzekli rekombinantu proteīnu ražošanai un gēnu rediģēšanas pētījumiem. Tā atbalsta dažādu peļu retrovīrusu replikāciju, atvieglojot stabilu rekombinantu līniju, kas ekspresē vēlamos gēnus, ražošanu. Šī īpašība ir padarījusi C127I šūnas īpaši noderīgas molekulārās bioloģijas un ģenētikas jomā, kur tās bieži izmanto, lai kontrolētā vidē pētītu gēnu pārmērīgas ekspresijas vai izslēgšanas ietekmi.

Audums
Krūtis, piena dziedzeris
Slimība
Karcinoma
Pieteikumi
Transfekcijas saimnieks transformācijai ar govju papilomas vīrusa DNS plazmīdām. Sarkomas vīrusa izraisīto perēkļu vizualizācija. Liellopu papilomas vīrusa kvantitatīvie in vitro testi.
Sinonīmi
  • C 1271
  • C-127I
  • C-127 I
  • CNC 127I

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This murine breast carcinoma cell line (C127I) contains recombinant viral sequences encoding T7 RNA polymerase and CFTR delivered via infection with engineered viruses, functioning as a transfection host. The construct is stably integrated into C127 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
C127I (Cytion kataloga numurs 400134)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_3882

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Negatīvs attiecībā uz ektromēlijas vīrusu (peļu bakas).
Jutība pret vīrusiem
Liellopu papilomas vīruss
Reversā transkriptāze
Negatīvs (noteikts supernatanta šķidrumā)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
RIII