Ga naar de inhoud
C127I
Weefsel
Borst, borstklier
Ziekte
Carcinoom
Synoniemen
C 1271, C-127I, C-127 I, CNC 127I

Documenten

C127I

Cell line · Productnummer 400134

The C127I cell line is a murine mammary gland epithelial cell line, commonly used in biomedical research for its ability to synthesize and secrete recombi...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De C127I cellijn is een epitheelcellijn uit de melkklier van muizen, die vaak gebruikt wordt in biomedisch onderzoek vanwege zijn vermogen om recombinante eiwitten te synthetiseren en af te scheiden. Deze cellen zijn afkomstig uit de borstklier van de BALB/c muis en staan vooral bekend om hun epitheliale morfologie en respons op hormonen en andere groeifactoren. De C127I cellijn heeft een belangrijke rol gespeeld bij het bestuderen van genexpressie, signaaltransductiepaden met betrekking tot de ontwikkeling van kanker en de productie van virale vectoren voor gentherapie.

Een van de belangrijkste eigenschappen van de C127I cellijn is het vermogen om gemakkelijk getransfecteerd te worden, waardoor het een waardevol hulpmiddel is voor de productie van recombinante eiwitten en voor gen editing studies. Het ondersteunt de replicatie van verschillende murine retrovirussen, waardoor de productie van stabiele recombinante lijnen die gewenste genen tot expressie brengen wordt vergemakkelijkt. Deze eigenschap heeft C127I cellen vooral nuttig gemaakt op het gebied van moleculaire biologie en genetica, waar ze vaak worden gebruikt om de effecten van genoverexpressie of knockdown in een gecontroleerde omgeving te onderzoeken.

Weefsel
Borst, borstklier
Ziekte
Carcinoom
Toepassingen
Transfectiegastheer voor transformatie met DNA-plasmiden van het boviene papillomavirus. Visualisatie van door sarcoomvirus veroorzaakte foci. Kwantitatieve in-vitrotests voor bovien papillomavirus.
Synoniemen
  • C 1271
  • C-127I
  • C-127 I
  • CNC 127I

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This murine breast carcinoma cell line (C127I) contains recombinant viral sequences encoding T7 RNA polymerase and CFTR delivered via infection with engineered viruses, functioning as a transfection host. The construct is stably integrated into C127 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
C127I (Cytion catalogusnummer 400134)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_3882

05Expressie en vatbaarheid

Virussen
Negatief voor ectromeliavirus (muizenpokken).
Gevoeligheid voor virussen
Bovien papillomavirus
Reverse transcriptase
Negatief (zoals bepaald in bovenstaande vloeistof)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
RIII