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C127I
Gewebe
Brust, Brustdrüse
Krankheit
Karzinom
Synonyme
C 1271, C-127I, C-127 I, CNC 127I

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C127I

Cell line · Artikelnummer 400134

The C127I cell line is a murine mammary gland epithelial cell line, commonly used in biomedical research for its ability to synthesize and secrete recombi...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie C127I ist eine Epithelzelllinie der Brustdrüse von Mäusen, die in der biomedizinischen Forschung häufig wegen ihrer Fähigkeit zur Synthese und Sekretion rekombinanter Proteine verwendet wird. Diese Zellen stammen aus der Brustdrüse der BALB/c-Maus und zeichnen sich durch ihre epitheliale Morphologie und ihre Empfindlichkeit gegenüber Hormonen und anderen Wachstumsfaktoren aus. Die C127I-Zelllinie hat bei der Erforschung der Genexpression, der Signaltransduktionswege im Zusammenhang mit der Krebsentwicklung und der Herstellung von viralen Vektoren für die Gentherapie eine wichtige Rolle gespielt.

Eine der wichtigsten Eigenschaften der C127I-Zelllinie ist ihre Fähigkeit, sich leicht transfizieren zu lassen, was sie zu einem wertvollen Werkzeug für die Herstellung rekombinanter Proteine und für Studien zum Gene Editing macht. Sie unterstützt die Replikation verschiedener muriner Retroviren, was die Herstellung stabiler rekombinanter Linien, die gewünschte Gene exprimieren, erleichtert. Aufgrund dieser Eigenschaft sind C127I-Zellen besonders nützlich in den Bereichen Molekularbiologie und Genetik, wo sie häufig eingesetzt werden, um die Auswirkungen von Genüberexpression oder -knockdown in einer kontrollierten Umgebung zu untersuchen.

Gewebe
Brust, Brustdrüse
Krankheit
Karzinom
Anwendungen
Transfektionswirt für die Transformation mit Rinderpapillomavirus-DNA-Plasmiden. Visualisierung von Sarkomvirus-induzierten Herden. Quantitative In-vitro-Tests für Rinderpapillomavirus.
Synonyme
  • C 1271
  • C-127I
  • C-127 I
  • CNC 127I

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This murine breast carcinoma cell line (C127I) contains recombinant viral sequences encoding T7 RNA polymerase and CFTR delivered via infection with engineered viruses, functioning as a transfection host. The construct is stably integrated into C127 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich

04Bezeichner

Quellenangabe
C127I (Cytion Katalognummer 400134)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_3882

05Expression und Anfälligkeit

Viren
Negativ für Ektromelie-Virus (Mauspocken).
Anfälligkeit für Viren
Bovines Papillomavirus
Reverse Transkriptase
Negativ (wie in der überstehenden Flüssigkeit bestimmt)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
RIII