Přejít na obsah
C127I
Tkáň
Prsa, mléčná žláza
Nemoc
Karcinom
Synonyma
C 1271, C-127I, C-127 I, CNC 127I

Dokumenty

C127I

Cell line · Číslo výrobku 400134

The C127I cell line is a murine mammary gland epithelial cell line, commonly used in biomedical research for its ability to synthesize and secrete recombi...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie C127I je epiteliální buněčná linie mléčné žlázy myší, která se běžně používá v biomedicínském výzkumu pro svou schopnost syntetizovat a vylučovat rekombinantní proteiny. Tyto buňky pocházejí z mléčné žlázy myši BALB/c a vyznačují se zejména epiteliální morfologií a reaktivitou na hormony a další růstové faktory. Buněčná linie C127I je důležitá pro studium genové exprese, signálních přenosových drah souvisejících s vývojem rakoviny a pro výrobu virových vektorů pro genovou terapii.

Jednou z klíčových vlastností buněčné linie C127I je její schopnost snadné transfekce, což z ní činí cenný nástroj pro produkci rekombinantních proteinů a pro studie editace genů. Podporuje replikaci různých myších retrovirů, což usnadňuje produkci stabilních rekombinantních linií exprimujících žádoucí geny. Díky této vlastnosti jsou buňky C127I obzvláště užitečné v oblasti molekulární biologie a genetiky, kde se často používají ke zkoumání účinků nadměrné exprese nebo knockdownu genů v kontrolovaném prostředí.

Tkáň
Prsa, mléčná žláza
Nemoc
Karcinom
Aplikace
Transfekční hostitel pro transformaci DNA plazmidy bovinního papilomaviru. Vizualizace ohnisek indukovaných sarkomovým virem. Kvantitativní testy in vitro na přítomnost bovinního papilomaviru.
Synonyma
  • C 1271
  • C-127I
  • C-127 I
  • CNC 127I

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This murine breast carcinoma cell line (C127I) contains recombinant viral sequences encoding T7 RNA polymerase and CFTR delivered via infection with engineered viruses, functioning as a transfection host. The construct is stably integrated into C127 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citace
C127I (katalogové číslo Cytion 400134)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_3882

05Exprese a náchylnost

Viry
Negativní na virus ektromelie (myší neštovice).
Náchylnost k virům
Bovinní papiloma virus
Reverzní transkriptáza
Negativní (stanoveno v supernatantní tekutině)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
RIII