Mine otse sisu juurde
C127I
Kude
Rind, rinnanäärme
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
C 1271, C-127I, C-127 I, CNC 127I

Dokumendid

C127I

Cell line · Toote number 400134

The C127I cell line is a murine mammary gland epithelial cell line, commonly used in biomedical research for its ability to synthesize and secrete recombi...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

C127I rakuliin on hiire rinnanäärme epiteelirakuliin, mida kasutatakse tavaliselt biomeditsiinilistes uuringutes selle võime tõttu sünteesida ja eritada rekombinantseid valke. Need rakud pärinevad BALB/c hiire rinnanäärmest ja on eriti tuntud oma epiteeli morfoloogia ja tundlikkuse poolest hormoonidele ja muudele kasvufaktoritele. C127I rakuliin on aidanud kaasa geeniekspressiooni ja vähi arenguga seotud signaaliülekande radade uurimisele ning geeniteraapia viirusvektorite tootmisele.

C127I rakuliini üks peamisi omadusi on selle võime kergesti transfekteerida, mis teeb sellest väärtusliku vahendi rekombinantsete valkude tootmiseks ja geenitöötluse uuringuteks. See toetab erinevate hiire retroviiruste replikatsiooni, hõlbustades soovitud geene ekspresseerivate stabiilsete rekombinantsete liinide tootmist. See omadus on muutnud C127I rakud eriti kasulikuks molekulaarbioloogia ja geneetika valdkonnas, kus neid kasutatakse sageli geenide üleekspressiooni või knockdown'i mõju uurimiseks kontrollitud keskkonnas.

Kude
Rind, rinnanäärme
Haigus
Kartsinoom
Rakendused
Transfektsiooni peremees veiste papilloomiviiruse DNA-plasmiididega transformeerimiseks. Sarkoomiviiruse põhjustatud fookuste visualiseerimine. Veiste papilloomiviiruse kvantitatiivsed in vitro analüüsid.
Sünonüümid
  • C 1271
  • C-127I
  • C-127 I
  • CNC 127I

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This murine breast carcinoma cell line (C127I) contains recombinant viral sequences encoding T7 RNA polymerase and CFTR delivered via infection with engineered viruses, functioning as a transfection host. The construct is stably integrated into C127 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
C127I (Cytioni katalooginumber 400134)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_3882

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
Ektromelia viiruse (hiireviiruse) suhtes negatiivne.
Viirusele vastuvõtlikkus
Veiste papilloomiviirus
Pöördtranskriptaas
Negatiivne (määratud supernatantvedelikus)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
RIII