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C127I
Tecido
Mama, glândula mamária
Doença
Carcinoma
Sinónimos
C 1271, C-127I, C-127 I, CNC 127I

Documentos

C127I

Cell line · Número do produto 400134

The C127I cell line is a murine mammary gland epithelial cell line, commonly used in biomedical research for its ability to synthesize and secrete recombi...

€430.00sem impostos nem portes de envio
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01Informações gerais

Descrição

A linha de células C127I é uma linha de células epiteliais da glândula mamária murina, normalmente utilizada na investigação biomédica pela sua capacidade de sintetizar e segregar proteínas recombinantes. Estas células são originárias da glândula mamária do rato BALB/c e são particularmente conhecidas pela sua morfologia epitelial e capacidade de resposta a hormonas e outros factores de crescimento. A linha celular C127I tem sido fundamental no estudo da expressão genética, das vias de transdução de sinais relacionadas com o desenvolvimento do cancro e na produção de vectores virais para terapia genética.

Uma das principais caraterísticas da linha celular C127I é a sua capacidade de ser facilmente transfectada, o que a torna uma ferramenta valiosa para a produção de proteínas recombinantes e para estudos de edição de genes. Suporta a replicação de vários retrovírus murinos, facilitando a produção de linhas recombinantes estáveis que expressam genes desejáveis. Esta caraterística tornou as células C127I especialmente úteis nos domínios da biologia molecular e da genética, onde são frequentemente utilizadas para explorar os efeitos da sobreexpressão ou supressão de genes num ambiente controlado.

Tecido
Mama, glândula mamária
Doença
Carcinoma
Aplicações
Hospedeiro de transfecção para transformação com plasmídeos de ADN do vírus do papiloma bovino. Visualização de focos induzidos pelo vírus do sarcoma. Ensaios quantitativos in vitro para o vírus do papiloma bovino.
Sinónimos
  • C 1271
  • C-127I
  • C-127 I
  • CNC 127I

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This murine breast carcinoma cell line (C127I) contains recombinant viral sequences encoding T7 RNA polymerase and CFTR delivered via infection with engineered viruses, functioning as a transfection host. The construct is stably integrated into C127 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial

04Identificadores

Referência
C127I (número de catálogo Cytion 400134)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_3882

05Expressão e suscetibilidade

Vírus
Negativo para o vírus da ectromelia (varíola do rato).
Susceptibilidade ao vírus
Vírus do papiloma bovino
Transcriptase reversa
Negativo (conforme determinado no fluido sobrenadante)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
RIII