Pāriet uz saturu
GT1-1
Audums
Smadzenes, hipotalāms

Dokumenti

GT1-1

Cell line · Preces numurs 305497

GT1-1 šūnu līnija ir iegūta no hipotalāma un ir pazīstama ar tās izmantošanu neirozinātnes pētījumos. Šī peles šūnu līnija tika izveidota no...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Pēc pasūtījuma
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

GT1-1 šūnu līnija ir iegūta no hipotalāma un ir pazīstama ar tās izmantošanu neirozinātnes pētījumos. Šī peles šūnu līnija tika izveidota no ģenētiski mērķtiecīgi modificētām audzēja šūnām, kas cēlušās no priekšējā hipotalāma un kurās konkrēti atrodas neironi ar neiroendokrīnām īpašībām. GT1-1 šūnas ekspresē dažādus hipotalāma neironiem raksturīgus marķierus, tostarp tos, kas iesaistīti gonadotropīnu atbrīvojošā hormona (GnRH) sintēzē un izdalīšanā, kam ir izšķiroša loma reproduktīvajā bioloģijā.

GT1-1 šūnas ir īpaši noderīgas, lai pētītu mehānismus, kas saistīti ar neiroendokrīno funkciju, sekrēciju un neironu signālceļiem. Tās bieži izmanto kā modeļus, lai pētītu regulējošos procesus, kas ir hipotalāma hormonu sekrēcijas pamatā, tostarp šūnu reakcijas uz dažādiem neiropeptīdiem un citiem fizioloģiskiem stimuliem. Šīs šūnu līnijas spēja pulsveidīgi izdalīt GnRH nodrošina uzticamu sistēmu neiroendokrīnās regulācijas un ar to saistītu patoloģiju izpētei, piemēram, tām, kas ietekmē auglību un reproduktīvo endokrinoloģiju.

Audums
Smadzenes, hipotalāms

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This GT1-1 neuronal line contains an SV40 large T-antigen construct driven by the rat GnRH1 promoter for neuroendocrine research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Šūnu tips
GnRH neirons

04Identifikatori

Atsauce
GT1-1 (Cytion kataloga numurs 305497)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_6236

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Transformants: Sīmiāna vīruss 40 (SV40)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
(C57BL/6J x BALB/cJ) F2 transgēns ar žurkas Gnrh1 promotoru — Tg(SV40)