Pāriet uz saturu
NCI-H596
Audums
Plaušas
Slimība
Adenokvamozas šūnas karcinoma
Sinonīmi
H596, H-596, NCI-HUT-596, NCIH596

Dokumenti

NCI-H596

Cell line · Preces numurs 305277

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NCI-H596 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka plaušu adenokvamozās karcinomas. Šī unikālā šūnu līnija tiek plaši izmantota plaušu vēža pētījumos, nodrošinot modeli, lai pētītu adenokvamozās karcinomas - reta plaušu nedaliklo šūnu vēža apakštipa, kam piemīt gan adenokarcinomas, gan plakanšūnu karcinomas pazīmes - īpašības un uzvedību. NCI-H596 šūnu līnija ir vērtīga, lai pētītu šī hibrīda vēža tipa molekulāro un ģenētisko pamatu, kā arī lai pārbaudītu iespējamās terapeitiskās iejaukšanās.

NCI-H596 šūnām ir epitēlija morfoloģija un tās ekspresē marķierus, kas norāda gan uz adenokarcinomu, gan plakanšūnu karcinomu, tostarp citokeratīnus un mucīna proteīnus. Tām ir plaušu vēzim raksturīgas ģenētiskas izmaiņas, piemēram, mutācijas KRAS un TP53 gēnos, kas ir galvenie šūnu signalizācijas, augšanas un apoptozes procesi. Pētnieki izmanto NCI-H596 šūnas, lai izpētītu audzēja progresēšanā iesaistītos signālu ceļus, piemēram, EGFR, MAPK un PI3K/Akt ceļus. Šīs šūnas izmanto arī zāļu atklāšanā un izstrādē, ļaujot novērtēt ķīmijterapeitiskos līdzekļus, mērķterapijas un jaunas ārstēšanas kombinācijas. NCI-H596 šūnu līnijas duālās histoloģiskās īpatnības padara to par ļoti svarīgu instrumentu, lai izprastu adenokamozās karcinomas sarežģītību un pilnveidotu terapeitiskās stratēģijas plaušu vēža ārstēšanā.

Audums
Plaušas
Slimība
Adenokvamozas šūnas karcinoma
Sinonīmi
  • H596
  • H-596
  • NCI-HUT-596
  • NCIH596

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm

04Identifikatori

Atsauce
NCI-H596 (Cytion kataloga numurs 305277)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1571

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: PIK3CA, p.Glu545Lys (c.1633G>A), heterozigotiska; Mutācija: PIK3CA, p.Glu545Lys (c.1633G>A), heterozigotiska; Mutācija: RB1, p.Ser182fs*3 (c.541_542insT), heterozigotiska; mutācija: TP53, p.Gly245Cys (c.733G>T), homozigotiska

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
73 gadi
Etniskā piederība
Eiropas

10Informācija par produktu

Sastāva tabula