Pāriet uz saturu
OS-RC-2
Audums
Nieres
Slimība
Dzidro šūnu nieru šūnu karcinoma
Sinonīmi
OSRC2, RC-2

Dokumenti

OS-RC-2

Cell line · Preces numurs 305086

The OS-RC-2 cell line is a human renal cell carcinoma (RCC) model established from the tumor of a Japanese male patient diagnosed with clear cell RCC. Thi...

€650.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

OS-RC-2 šūnu līnija ir cilvēka nieru šūnu karcinomas (RCC) modelis, kas izveidots no japāņu vīrieša audzēja, kuram diagnosticēta gaiššūnu RCC. Šai šūnu līnijai ir raksturīgas RCC raksturīgās pazīmes, tostarp daudz garu mikrovīlīšu uz tās virsmas un glikogēna granulas citoplazmā, kā novērots elektronmikroskopijā. Šīs pazīmes ir ļoti līdzīgas proksimālo tubulāro epitēlija šūnu pazīmēm, kas tiek uzskatītas par gaiššūnu RCC izcelsmi.

OS-RC-2 ir izrādījies tumorogēns imūnkompromitētām pelēm, kuru ksenotransplantātu audzēju histopatoloģiskās pazīmes ir ļoti līdzīgas sākotnējam pacienta audzējam. OS-RC-2 hromosomu analīzes atklāj hipodiploīdu modālo skaitu 40, ar pierādījumiem par marķieru hromosomu un specifisku translokāciju starp 2. un 13. hromosomu. Turklāt lielā šūnu populācijas apakšgrupā ir hipotraploīds kariotips ar modālo skaitu 75. Šīs ģenētiskās īpašības padara OS-RC-2 par vērtīgu modeli hromosomu aberāciju un RCC audzēju bioloģijas izpētei.

Turpmāki pētījumi, izmantojot OS-RC-2, ir atklājuši citokīnu, tostarp audzēja nekrozes faktora alfa (TNF-α) un interleikīna-6 (IL-6), lomu RCC. Pētījumi liecina, ka, lai gan TNF-α OS-RC-2 neveicina DNS sintēzi vai šūnu proliferāciju, tas var stimulēt IL-6 veidošanos augstās koncentrācijās. Šie atklājumi palīdz izprast citokīnu sarežģīto mijiedarbību RCC progresēšanā un audzēja mikrovidē, padarot OS-RC-2 par noderīgu līdzekli RCC terapeitisko iejaukšanos izpētei.

Audums
Nieres
Slimība
Dzidro šūnu nieru šūnu karcinoma
Sinonīmi
  • OSRC2
  • RC-2

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā

04Identifikatori

Atsauce
OS-RC-2 (Cytion kataloga numurs 305086)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1626

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
52 gadi
Etniskā piederība
Āzijas