Ga naar de inhoud
3D4/21
Weefsel
Long
Synoniemen
IPAM 3D4/21, IPAM-WT

Documenten

3D4/21

Cell line · Productnummer 305357

The 3D4/21 cell line is a porcine alveolar macrophage model extensively used in studies involving immune responses and viral infections. These cells are p...

€550.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De 3D4/21-cellijn is een model van alveolaire macrofagen van varkens dat op grote schaal wordt gebruikt in onderzoeken naar immuunreacties en virale infecties. Deze cellen zijn met name waardevol voor onderzoek naar luchtweginfecties bij varkens, zoals die veroorzaakt worden door het varkensinfluenzavirus (SIV) en Senecavirus A (SVA). Omdat 3D4/21-cellen afkomstig zijn van alveolaire macrofagen, fungeren ze als een cruciaal in-vitrosysteem voor het onderzoeken van interacties tussen gastheer en ziekteverwekker, waarbij de nadruk ligt op de immuunmechanismen die varkens inzetten tegen respiratoire pathogenen.

3D4/21-cellen worden vaak gebruikt om de moleculaire routes te onderzoeken die tijdens infecties in gang worden gezet. In de context van SIV-infecties hebben studies bijvoorbeeld aangetoond dat 3D4/21-cellen een immuunrespons opwekken door de expressie van diverse cytokines en virale herkenningsreceptoren zoals RIG-I en TLR7. Bovendien hebben deze cellen een belangrijke rol gespeeld bij het vaststellen hoe verschillende RNA-moleculen, waaronder miRNA’s, lncRNA’s en circRNA’s, bijdragen aan de regulerende netwerken tijdens virale infecties, wat inzicht biedt in de regulerende mechanismen van competitief endogeen RNA (ceRNA) die helpen bij antivirale afweer. Dit is met name nuttig gebleken bij het ophelderen van de immuunreacties die worden geactiveerd door verschillende stammen van varkensinfluenzavirussen, zoals H1N1 en H3N2.

Daarnaast zijn 3D4/21-cellen ingezet om autofagie en de rol daarvan bij infectiebeheersing te bestuderen. Bij een infectie met Haemophilus parasuis vertonen deze cellen bijvoorbeeld autofagische reacties die worden gereguleerd via de AMPK-signaalroute. Dit autofagiemechanisme draagt niet alleen bij aan het beheersen van bacteriële invasie, maar helpt ook bij het begrijpen van de pathogenese van ziekten zoals de ziekte van Glässer, een aandoening die varkens onder stress treft. Daardoor blijft de 3D4/21-cellijn een waardevol hulpmiddel voor immunologisch en infectieziekteonderzoek in de context van de varkensgezondheid.

Weefsel
Long
Synoniemen
  • IPAM 3D4/21
  • IPAM-WT

02Classificatie

Organisme
Varken
Seks
Niet gespecificeerd
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Macrofaag
Celtype
Alveolaire macrofaag

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
3D4/21 (Cytion-catalogusnummer 305357)
NCBI-belastingnummer
9823
Cellosaurus
CVCL_0F14

05Expressie en vatbaarheid

Virussen
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Zaaidichtheid
1-3*10⁴/cm²
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
Landras
Leeftijd van de donor
12 weken