Přejít na obsah
3D4/21
Tkáň
Plíce
Synonyma
IPAM 3D4/21, IPAM-WT

Dokumenty

3D4/21

Cell line · Číslo výrobku 305357

The 3D4/21 cell line is a porcine alveolar macrophage model extensively used in studies involving immune responses and viral infections. These cells are p...

€550.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie 3D4/21 představuje model prasečích alveolárních makrofágů, který se hojně využívá ve studiích zabývajících se imunitními reakcemi a virovými infekcemi. Tyto buňky jsou obzvláště cenné pro výzkum respiračních infekcí u prasat, jako jsou například infekce způsobené virem prasečí chřipky (SIV) a senecavirem A (SVA). Vzhledem k tomu, že pocházejí z alveolárních makrofágů, slouží buňky 3D4/21 jako klíčový in vitro systém pro zkoumání interakcí mezi hostitelem a patogenem, se zaměřením na imunitní mechanismy, které prasata využívají proti respiračním patogenům.

Buňky 3D4/21 se často využívají k prozkoumání molekulárních drah spouštěných během infekcí. Například v souvislosti s infekcemi SIV studie ukázaly, že buňky 3D4/21 vyvolávají imunitní reakci prostřednictvím exprese různých cytokinů a receptorů rozpoznávajících viry, jako jsou RIG-I a TLR7. Kromě toho tyto buňky sehrály klíčovou roli při identifikaci toho, jak různé molekuly RNA, včetně miRNA, lncRNA a circRNA, přispívají k regulačním sítím během virových infekcí, čímž poskytují vhled do regulačních mechanismů kompetitivní endogenní RNA (ceRNA), které napomáhají antivirové obraně. To se ukázalo jako obzvláště užitečné při objasňování imunitních reakcí vyvolaných různými kmeny virů prasečí chřipky, jako jsou H1N1 a H3N2.

Kromě toho byly buňky 3D4/21 využity ke studiu autofagie a její role v potlačování infekcí. Například během infekce Haemophilus parasuis vykazují tyto buňky autofagické reakce regulované prostřednictvím signální dráhy AMPK. Tento autofagický mechanismus nejenže přispívá k potlačení bakteriální invaze, ale také pomáhá porozumět patogenezi onemocnění, jako je Glässerova choroba, která postihuje prasata ve stresu. Díky tomu zůstává buněčná linie 3D4/21 i nadále cenným nástrojem pro imunologický výzkum a výzkum infekčních onemocnění v kontextu zdraví prasat.

Tkáň
Plíce
Synonyma
  • IPAM 3D4/21
  • IPAM-WT

02Klasifikace

Organismus
Prase
Sex
Nespecifikováno
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Makrofágy
Typ buňky
Alveolární makrofág

04Identifikátory

Citace
3D4/21 (katalogové číslo Cytion 305357)
Daňové identifikační číslo NCBI
9823
Cellosaurus
CVCL_0F14

05Exprese a náchylnost

Viry
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Hustota výsevu
1–3 × 10⁴/cm²
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
Landrace
Věk dárce
12 týdnů