3D4/21

A linha celular 3D4/21 é um modelo de macrófagos alveolares suínos amplamente utilizado em estudos que envolvem respostas imunitárias e infeções virais. Estas células são particularmente valiosas para a investigação sobre infeções respiratórias em suínos, tais como as causadas pelo vírus da gripe suína (SIV) e pelo Senecavirus A (SVA). Devido à sua origem nos macrófagos alveolares, as células 3D4/21 constituem um sistema in vitro fundamental para a análise das interações hospedeiro-patógeno, com foco nos mecanismos imunitários que os suínos mobilizam contra os agentes patogénicos respiratórios.

As células 3D4/21 são frequentemente utilizadas para explorar as vias moleculares desencadeadas durante as infeções. Por exemplo, no contexto das infeções por SIV, estudos demonstraram que as células 3D4/21 desencadeiam uma resposta imunitária através da expressão de várias citocinas e recetores de reconhecimento viral, como o RIG-I e o TLR7. Além disso, estas células têm sido fundamentais para identificar de que forma diferentes moléculas de ARN, incluindo miARNs, ARN de cadeia longa não codificante (lncARNs) e ARN circular (circARNs), contribuem para as redes reguladoras durante as infeções virais, proporcionando insights sobre os mecanismos reguladores do ARN endógeno competitivo (ceRNA) que auxiliam nas defesas antivirais. Isto tem-se revelado particularmente útil para elucidar as respostas imunitárias desencadeadas por diferentes estirpes de vírus da gripe suína, tais como o H1N1 e o H3N2.

Além disso, as células 3D4/21 têm sido utilizadas para estudar a autofagia e o seu papel no controlo da infeção. Por exemplo, durante a infeção por Haemophilus parasuis, estas células apresentam respostas autofágicas reguladas através da via de sinalização da AMPK. Este mecanismo de autofagia não só contribui para controlar a invasão bacteriana, como também ajuda a compreender a patogénese de doenças como a doença de Glässer, uma condição que afeta suínos em situação de stress. Consequentemente, a linha celular 3D4/21 continua a ser uma ferramenta valiosa para a investigação imunológica e de doenças infecciosas no contexto da saúde suína.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia