Pāriet uz saturu
3D4/21
Audums
Plaušas
Sinonīmi
IPAM 3D4/21, IPAM-WT

Dokumenti

3D4/21

Cell line · Preces numurs 305357

The 3D4/21 cell line is a porcine alveolar macrophage model extensively used in studies involving immune responses and viral infections. These cells are p...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Šūnu līnija 3D4/21 ir cūku alveolāro makrofāgu modelis, ko plaši izmanto pētījumos par imūnreakcijām un vīrusu infekcijām. Šīs šūnas ir īpaši vērtīgas pētījumos par elpceļu infekcijām cūkām, piemēram, tām, ko izraisa cūku gripas vīruss (SIV) un Senecavirus A (SVA). Tā kā 3D4/21 šūnas ir cēlušās no alveolārajiem makrofāgiem, tās kalpo kā būtiska in vitro sistēma, lai pētītu saimnieka un patogēna mijiedarbību, pievēršot uzmanību imūnajiem mehānismiem, ko cūkas izmanto pret elpošanas ceļu patogēniem.

3D4/21 šūnas bieži izmanto, lai pētītu infekciju laikā aktivizētos molekulāros ceļus. Piemēram, saistībā ar SIV infekcijām pētījumi ir parādījuši, ka 3D4/21 šūnas izraisa imūnreakciju, ekspresējot dažādus citokīnus un vīrusu atpazīšanas receptorus, piemēram, RIG-I un TLR7. Turklāt šīs šūnas ir bijušas izšķirošas, nosakot, kā dažādas RNS molekulas, tostarp miRNA, lncRNA un circRNA, ietekmē regulatīvās tīklojumus vīrusu infekciju laikā, sniedzot ieskatu konkurējošās endogēnās RNS (ceRNA) regulatīvajos mehānismos, kas palīdz pretvīrusu aizsardzībā. Tas ir bijis īpaši noderīgi, lai izskaidrotu imūnreakcijas, ko izraisa dažādi cūku gripas vīrusu celmi, piemēram, H1N1 un H3N2.

Turklāt 3D4/21 šūnas ir izmantotas, lai pētītu autofāgiju un tās lomu infekcijas kontrolē. Piemēram, Haemophilus parasuis infekcijas laikā šīs šūnas parāda autofāgiskas reakcijas, kuras regulē AMPK signālceļš. Šis autofāgijas mehānisms ne tikai palīdz kontrolēt baktēriju invāziju, bet arī palīdz izprast tādu slimību patogēnēzi kā Glāseras slimība — slimība, kas skar cūkas stresa apstākļos. Rezultātā 3D4/21 šūnu līnija joprojām ir vērtīgs instruments imunoloģiskajos un infekcijas slimību pētījumos saistībā ar cūku veselību.

Audums
Plaušas
Sinonīmi
  • IPAM 3D4/21
  • IPAM-WT

02Klasifikācija

Organisms
Cūka
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Makrofāgi
Šūnu tips
Alveolārais makrofāgs

04Identifikatori

Atsauce
3D4/21 (Cytion kataloga numurs 305357)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9823
Cellosaurus
CVCL_0F14

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Transformants: Sīmiāna vīruss 40 (SV40)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Sēšanas blīvums
1–3 × 10⁴/cm²
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Landrace
Donora vecums
12 nedēļas