Przejdź do treści
Komórki KG-1
Chusteczka
Szpik kostny
Choroba
Ostra białaczka szpikowa
Synonimy
KG1

Dokumenty

Komórki KG-1

Cell line · Numer produktu 300208

KG-1 to ludzka linia komórkowa ostrej białaczki szpikowej (AML) pochodząca ze szpiku kostnego dorosłego pacjenta cierpiącego na erytroleukemię. Linia ta stanowi cenne...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

KG-1 to ludzka linia komórkowa ostrej białaczki szpikowej (AML) pochodząca ze szpiku kostnego dorosłego pacjenta z erytroleukemią. Ta linia komórkowa jest cennym modelem do badania różnicowania hematopoetycznego i białaczki, szczególnie ze względu na jej unikalne cechy, w tym ekspresję kilku markerów hematopoetycznych. Komórki KG-1 są klasyfikowane jako niedojrzałe komórki mieloidalne, które przypominają wczesne komórki progenitorowe, co czyni je użytecznym narzędziem do badania wczesnych etapów zaangażowania linii mieloidalnej i mechanizmów molekularnych napędzających białaczkę.

Komórki KG-1 wykazują wysoki stopień plastyczności, co pozwala im różnicować się w różne linie krwiotwórcze w odpowiednich warunkach eksperymentalnych. Cecha ta jest szczególnie ważna dla badań nad zrozumieniem regulacji hematopoezy i rozwoju strategii terapeutycznych ukierunkowanych na białaczkowe komórki macierzyste. Ponadto, komórki KG-1 wykazują ekspresję markerów takich jak CD34, HLA-DR i CD13, które są kluczowe zarówno w prawidłowej, jak i złośliwej hematopoezy, co czyni je doskonałym modelem do cytometrii przepływowej i innych badań immunofenotypowych.

KG-1 został również wykorzystany do odkrywania leków i testowania toksyczności, gdzie można ocenić jego reaktywność na czynniki różnicujące i leki chemioterapeutyczne. Podobnie jak w przypadku wszystkich modeli in vitro, ważne jest, aby pamiętać, że komórki KG-1 są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie nadają się do zastosowań terapeutycznych lub in vivo.

Chusteczka
Szpik kostny
Choroba
Ostra białaczka szpikowa
Synonimy
  • KG1

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Typ komórki
Mieloblast
Czas podwojenia
45 godzin

04Identyfikatory

Źródło
KG-1 (numer katalogowy Cytion 300208)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0374

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
HLA A30, A31, B35, Cw4
Izoenzymy
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 0, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 0, GLO-1, 2
Wirusy
EBNA (EBNA ): ujemny
Transkryptaza odwrotna
Negatywny

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
IMDM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM pirogronianu sodu, w: 3,024 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820800a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Przenieś zawiesinę komórek do sterylnych probówek wirówkowych. Zbierz komórki, wirując je z prędkością 300 x g przez 3 minuty. Wylej supernatant i ponownie zawieś osadzone komórki w świeżej pożywce do hodowli komórek. Dostosuj do optymalnej gęstości komórek między 1 a 3 x 105 komórek/ml. Podziel komórki, gdy osiągną maksymalną gęstość 1–2 x 106 komórek/ml.
Odnawianie płynów
Co 3 dni
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Pozostawić komórki do regeneracji po procesie zamrażania przez co najmniej 24 godziny.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
59 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski