Siirry sisältöön
KG-1-solut
Kudos
Luuydin
Sairaus
Akuutti myelogeeninen leukemia
Synonyymit
KG1

Asiakirjat

KG-1-solut

Cell line · Tuotenumero 300208

KG-1 on ihmisen akuutin myelooisen leukemian (AML) solulinja, joka on peräisin erytroleukemiaa sairastavan aikuispotilaan luuytimestä. Tämä solulinja on arvokas...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

KG-1 on ihmisen akuutti myelooinen leukemia (AML) -solulinja, joka on peräisin erytroleukemiaa sairastavan aikuispotilaan luuytimestä. Tämä solulinja on arvokas malli hematopoieettisen erilaistumisen ja leukemian tutkimiseen erityisesti sen ainutlaatuisten ominaisuuksien, kuten useiden hematopoieettisten merkkiaineiden ilmentymisen, vuoksi. KG-1-solut luokitellaan epäkypsiksi myelooisiksi soluiksi, jotka muistuttavat varhaisia esiasteen soluja, mikä tekee niistä hyödyllisen välineen myelooisen linjan sitoutumisen varhaisvaiheiden ja leukemogeneesiä ohjaavien molekyylimekanismien tutkimiseen.

KG-1-soluilla on korkea plastisuusaste, jonka ansiosta ne voivat erilaistua eri hematopoieettisiin linjoihin oikeissa koeolosuhteissa. Tämä ominaisuus on erityisen tärkeä tutkimukselle, jolla pyritään ymmärtämään hematopoieesin säätelyä ja kehittämään terapeuttisia strategioita, joilla pyritään kohdistamaan leukeemisiin kantasoluihin. Lisäksi KG-1-solujen tiedetään ilmentävän CD34:n, HLA-DR:n ja CD13:n kaltaisia merkkiaineita, jotka ovat kriittisiä sekä normaalissa että pahanlaatuisessa hematopoieesissa, mikä tekee niistä erinomaisen mallin virtaussytometriaan ja muihin immunofenotyyppitutkimuksiin.

KG-1:tä on käytetty myös lääkkeiden löytämisessä ja toksisuustesteissä, joissa voidaan arvioida sen reagointikykyä erilaistumisaineisiin ja kemoterapeuttisiin lääkkeisiin. Kuten kaikkien in vitro -mallien kohdalla, on tärkeää huomata, että KG-1-solut ovat vain tutkimuskäyttöön eivätkä sovellu terapeuttisiin tai in vivo -sovelluksiin.

Kudos
Luuydin
Sairaus
Akuutti myelogeeninen leukemia
Synonyymit
  • KG1

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Myeloblastit
Kaksinkertaistumisaika
45 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
KG-1 (Cytionin luettelonumero 300208)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0374

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
HLA A30, A31, B35, Cw4
Isoentsyymit
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 0, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 0, GLO-1, 2
Virukset
EBNA (EBNA ): negatiivinen
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
IMDM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 3,024 g/l NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820800a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Siirrä solususpensio steriileihin sentrifugiputkiin. Kerää solut sentrifugoimalla 300 x g:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti ja suspendoi pelletoituneet solut uudelleen tuoreeseen soluviljelyväliaineeseen. Säädä solutiheys optimaaliseksi, 1–3 x 105 solua/ml. Jaa solut, kun solutiheys on saavuttanut maksimiarvon 1–2 x 106 solua/ml.
Nesteen uusiminen
3 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Anna solujen palautua pakastuksesta vähintään 24 tuntia.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
59 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen