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Células KG-1
Tecido
Medula óssea
Doença
Leucemia mielogénica aguda
Sinónimos
KG1

Documentos

Células KG-1

Cell line · Número do produto 300208

A KG-1 é uma linha celular de leucemia mielóide aguda (LMA) humana derivada da medula óssea de um doente adulto com eritroleucemia. Esta linha celular é uma valiosa...

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01Informações gerais

Descrição

KG-1 é uma linha celular de leucemia mieloide aguda (LMA) humana derivada da medula óssea de um doente adulto com eritroleucemia. Esta linha celular é um modelo valioso para o estudo da diferenciação hematopoiética e da leucemia, particularmente devido às suas caraterísticas únicas, incluindo a expressão de vários marcadores hematopoiéticos. As células KG-1 são classificadas como células mielóides imaturas que se assemelham a células progenitoras precoces, o que as torna uma ferramenta útil para investigar as fases iniciais do compromisso da linhagem mieloide e os mecanismos moleculares que conduzem à leucemogénese.

As células KG-1 exibem um elevado grau de plasticidade, o que lhes permite diferenciarem-se em várias linhagens hematopoiéticas sob as condições experimentais corretas. Esta caraterística é particularmente importante para a investigação na compreensão da regulação da hematopoiese e para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas que visem as células estaminais leucémicas. Além disso, sabe-se que as células KG-1 exprimem marcadores como CD34, HLA-DR e CD13, que são fundamentais na hematopoiese normal e maligna, o que as torna um excelente modelo para a citometria de fluxo e outros estudos de imunofenotipagem.

O KG-1 também tem sido utilizado na descoberta de medicamentos e em testes de toxicidade, onde pode ser avaliada a sua reação a agentes de diferenciação e a fármacos quimioterapêuticos. Tal como acontece com todos os modelos in vitro, é importante reconhecer que as células KG-1 se destinam apenas à investigação e não são adequadas para aplicações terapêuticas ou in vivo.

Tecido
Medula óssea
Doença
Leucemia mielogénica aguda
Sinónimos
  • KG1

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Tipo de célula
Mieloblastos
Tempo de duplicação
45 horas

04Identificadores

Referência
KG-1 (número de catálogo Cytion 300208)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0374

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
HLA A30, A31, B35, Cw4
Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 0, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 0, GLO-1, 2
Vírus
EBNA (EBNA ): negativo
Transcriptase reversa
Negativo

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
IMDM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-glutamina, com: 25 mM de HEPES, com: 1,0 mM de piruvato de sódio, com: 3,024 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820800a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Subcultura
Transfira a suspensão celular para tubos de centrifugação estéreis. Recolha as células centrifugando a 300xg durante 3 minutos. Descarte o sobrenadante e ressuspende as células sedimentadas em meio de cultura celular fresco. Ajuste para uma densidade celular ideal entre 1 e 3 x 105 células/ml. Divida as células quando for atingida uma densidade celular máxima de 1 a 2 x 106 células/ml.
Renovação de fluidos
A cada 3 dias
Recuperação após o descongelamento
Deixar as células recuperarem do processo de congelação durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
59 anos
Etnia
Caucasiano