Mine otse sisu juurde
KG-1 rakud
Kude
Luuüdi
Haigus
Äge müelogeenne leukeemia
Sünonüümid
KG1

Dokumendid

KG-1 rakud

Cell line · Toote number 300208

KG-1 on inimese ägeda müelogeense leukeemia (AML) rakuliin, mis on saadud erütroleukeemiaga täiskasvanud patsiendi luuüdist. See rakuliin on väärtuslik...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KG-1 on inimese ägeda müelogeense leukeemia (AML) rakuliin, mis on saadud täiskasvanud erütroleukeemiaga patsiendi luuüdist. See rakuliin on väärtuslik mudel hematopoeetilise diferentseerumise ja leukeemia uurimiseks, eelkõige selle ainulaadsete omaduste, sealhulgas mitmete hematopoeetiliste markerite ekspressiooni tõttu. KG-1 rakud liigitatakse ebaküpseteks müeloidseteks rakkudeks, mis sarnanevad varajastele eelkäijarakkudele, mistõttu on need kasulikud vahendid müeloidse liini kujunemise varajaste etappide ja leukeemogeneesi molekulaarmehhanismide uurimiseks.

KG-1 rakkudel on suur plastilisus, mis võimaldab neil õigetes katsetingimustes diferentseeruda erinevateks vereloome liinideks. See omadus on eriti oluline hematopoeesia regulatsiooni mõistmiseks ja leukeemiliste tüvirakkude vastu suunatud ravistrateegiate väljatöötamiseks. Lisaks ekspresseerivad KG-1 rakud teadaolevalt selliseid markereid nagu CD34, HLA-DR ja CD13, mis on nii normaalses kui ka pahaloomulises hematopoeesises kriitilise tähtsusega, mistõttu on nad suurepärane mudel voolutsütomeetria ja muude immunofenotüübi uuringute jaoks.

KG-1 on kasutatud ka ravimite avastamisel ja toksilisuse testimisel, kus saab hinnata nende reageerimist diferentseerivatele ainetele ja kemoterapeutilistele ravimitele. Nagu kõigi in vitro mudelite puhul, on oluline teadvustada, et KG-1 rakud on mõeldud ainult teadusuuringuteks ja ei sobi terapeutilisteks või in vivo rakendusteks.

Kude
Luuüdi
Haigus
Äge müelogeenne leukeemia
Sünonüümid
  • KG1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Müeloblast
Kahekordistumisaeg
45 tundi

04Tunnused

Viide
KG-1 (Cytioni katalooginumber 300208)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0374

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
HLA A30, A31, B35, Cw4
Isoensüümid
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 0, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 0, GLO-1, 2
Viirused
EBNA (EBNA ): negatiivne
Pöördtranskriptaas
Negatiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
IMDM, w: 4,5 g/L glükoos, w: 4 mM L-glutamiin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820800a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Kanna rakususpensioon steriilsetesse tsentrifuugitorudesse. Koguge rakud, tsentrifuugides 300xg kiirusel 3 minutit. Viskake supernatant ära ja suspendeerige pelletitud rakud uues rakukultuurikeskkonnas. Reguleerige optimaalseks rakutiheduseks 1–3 x 105 rakku/ml. Jagage rakud, kui maksimaalne rakutihedus 1–2 x 106 rakku/ml on saavutatud.
Vedeliku vahetus
Iga 3 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Laske rakkudel vähemalt 24 tundi külmutamisest taastuda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
59 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia