Przejdź do treści
KHYG-1
Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Białaczka limfoblastyczna/chłoniak z komórek NK
Synonimy
KHYG1, KHYG

Dokumenty

KHYG-1

Cell line · Numer produktu 305890

KHYG-1 is a human natural killer (NK) cell leukemia cell line established from the peripheral blood of an adult female patient diagnosed with aggressive N...

€500.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

KHYG-1 to ludzka linia komórek białaczkowych komórek NK (natural killer) wyhodowana z krwi obwodowej dorosłej pacjentki z rozpoznaniem agresywnej białaczki komórek NK. Linia komórkowa została wyhodowana w momencie postawienia diagnozy i reprezentuje nowotwór komórek NK ujemny pod względem wirusa Epsteina-Barra (EBV), co odróżnia ją od wielu modeli chłoniaków komórek NK/T związanych z EBV. Komórki KHYG-1 rosną w zawiesinie i wykazują cytomorfologiczne i immunofenotypowe cechy aktywowanych komórek NK, w tym ekspresję CD56 i cytoplazmatycznego CD3ε, przy braku powierzchniowego CD3 i rearanżacji genów receptora komórek T, co jest zgodne z prawdziwym pochodzeniem linii komórek NK.

Badania profilowania molekularnego objęły KHYG-1 analizami genomowymi i transkryptomicznymi nowotworów złośliwych komórek NK. Badania porównawczej hybrydyzacji genomowej i ekspresji genów w różnych liniach komórek NK pozwoliły zidentyfikować powtarzające się nieprawidłowości chromosomowe w nowotworach komórek NK, takie jak delecje obejmujące 6q21 i zmiany wpływające na szlaki supresji nowotworowej. W przeciwieństwie do kilku linii komórek NK dodatnich pod względem EBV, KHYG-1 nie wykazuje wykrywalnych zmian genu ATR w analizach pełnego regionu kodującego, co podkreśla molekularną heterogenność nowotworów komórek NK. Profilowanie ekspresji genów umieszcza KHYG-1 w klastrze linii komórek NK, charakteryzującym się ekspresją receptorów związanych z komórkami NK i cytotoksycznych cząsteczek efektorowych, i odróżniającym się od cytotoksycznych chłoniaków komórek T αβ i γδ.

Pod względem funkcjonalnym KHYG-1 wykazuje zależną od interleukiny-2 proliferację in vitro i zachowuje aktywność cytotoksyczną typową dla komórek NK. Linia ta jest szeroko stosowana do badania szlaków sygnałowych kluczowych dla przeżycia i proliferacji komórek NK, w tym kinazy Aurora A i składników szlaku NOTCH, a także do oceny potencjalnych inhibitorów terapeutycznych ukierunkowanych na nowotwory komórek NK. Jako model agresywnej białaczki komórek NK bez obecności wirusa EBV, KHYG-1 stanowi cenny system in vitro do badania wewnętrznych mechanizmów onkogennych w transformacji komórek NK, niezależnych od limfomogenezy wywołanej przez wirusy.

Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Białaczka limfoblastyczna/chłoniak z komórek NK
Synonimy
  • KHYG1
  • KHYG

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
podobny do limfocytów
Czas podwojenia
24–48 godzin; ~30–40 godzin; ~54 godziny, ~30 godzin, ~25 godzin

04Identyfikatory

Źródło
KHYG-1 (numer katalogowy Cytion 305890)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2976

05Ekspresja i podatność

Profil mutacji
Mutacja: p.Gly12Ala, nieokreślona; Mutacja: p.Arg248Trp, nieokreślona

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnij pożywkę 10% inaktywowaną termicznie surowicą płodową bydlęcą (FBS) i 10 ng/ml IL-2.
Odczynnik dysocjacyjny
Brak
Współczynnik podziału
Podzielić na 1/4 co 3-4 dni.
Odnawianie płynów
Proste rozcieńczenie ze względu na hodowlę komórek w zawiesinie. Podkultywuj co 3-4 dni przy współczynniku podziału = 1/4.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
45 lat
Pochodzenie etniczne
Japoński