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KHYG-1
Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Leucemia/linfoma linfoblastico a cellule natural killer
Sinonimi
KHYG1, KHYG

Documenti

KHYG-1

Cell line · Codice prodotto 305890

KHYG-1 is a human natural killer (NK) cell leukemia cell line established from the peripheral blood of an adult female patient diagnosed with aggressive N...

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01Informazioni generali

Descrizione

KHYG-1 è una linea cellulare di leucemia a cellule natural killer (NK) umane ottenuta dal sangue periferico di una paziente adulta con diagnosi di leucemia a cellule NK aggressiva. La linea cellulare è stata derivata alla diagnosi iniziale e rappresenta una neoplasia a cellule NK negativa al virus di Epstein-Barr (EBV), distinguendosi da molti modelli di linfoma a cellule NK/T associati all'EBV. Le cellule KHYG-1 crescono in sospensione e mostrano le caratteristiche citomorfologiche e immunofenotipiche delle cellule NK attivate, compresa l'espressione di CD56 e CD3ε citoplasmatico, mentre sono prive di CD3 di superficie e riarrangiamenti del gene del recettore delle cellule T, in linea con la derivazione dalla vera linea cellulare NK.

Gli studi di profilazione molecolare hanno incluso KHYG-1 nelle analisi genomiche e trascrittomiche delle neoplasie delle cellule NK. Studi di ibridazione genomica comparativa su array e di espressione genica su linee cellulari NK hanno identificato anomalie cromosomiche ricorrenti nei tumori delle cellule NK, come delezioni che coinvolgono 6q21 e alterazioni che influenzano i percorsi dei soppressori tumorali. A differenza di diverse linee cellulari NK positive all'EBV, KHYG-1 non presenta alterazioni rilevabili del gene ATR nelle analisi dell'intera regione codificante, sottolineando l'eterogeneità molecolare all'interno delle neoplasie delle cellule NK. Il profilo di espressione genica colloca KHYG-1 all'interno del cluster del lignaggio delle cellule NK, caratterizzato dall'espressione di recettori associati alle cellule NK e molecole effettrici citotossiche, e distinto dai linfomi citotossici delle cellule T αβ e γδ.

Dal punto di vista funzionale, KHYG-1 mostra una proliferazione interleuchina-2-dipendente in vitro e mantiene l'attività citotossica tipica delle cellule NK. La linea è stata ampiamente utilizzata per studiare le vie di segnalazione critiche per la sopravvivenza e la proliferazione delle cellule NK, tra cui l'aurora chinasi A e i componenti della via NOTCH, nonché per valutare i candidati inibitori terapeutici mirati alle neoplasie delle cellule NK. Come modello EBV-negativo di leucemia aggressiva delle cellule NK, KHYG-1 fornisce un prezioso sistema in vitro per lo studio dei meccanismi oncogenici intrinseci nella trasformazione delle cellule NK, indipendenti dalla linfomagenesi virale.

Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Leucemia/linfoma linfoblastico a cellule natural killer
Sinonimi
  • KHYG1
  • KHYG

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
simile ai linfociti
Tempo di raddoppio
24-48 ore; ~30-40 ore; ~54 ore, ~30 ore, ~25 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
KHYG-1 (numero di catalogo Cytion 305890)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2976

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: p.Gly12Ala, non specificata; Mutazione: p.Arg248Trp, non specificata

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Aggiungere al mezzo il 10% di FBS inattivato termicamente e 10 ng/ml di IL-2.
Reagente di dissociazione
Nessuno
Rapporto di frazionamento
Dividere in 4 parti ogni 3-4 giorni.
Rinnovo dei fluidi
Semplice diluizione dovuta alla coltura cellulare in sospensione. Subcoltura ogni 3-4 giorni con rapporto di divisione = 1/4.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controllo di qualità e crioconservazione

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo + 10% DMSO per ottenere un'adeguata vitalità post-scongelamento.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
45 anni
Etnia
Giapponese