Pāriet uz saturu
KHYG-1
Audums
Perifērās asinis
Slimība
Dabisko slepkavju šūnu limfoblastiskā leikēmija/limfoma
Sinonīmi
KHYG1, KHYG

Dokumenti

KHYG-1

Cell line · Preces numurs 305890

KHYG-1 is a human natural killer (NK) cell leukemia cell line established from the peripheral blood of an adult female patient diagnosed with aggressive N...

€500.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

KHYG-1 ir cilvēka dabiskā slepkava (NK) šūnu leikēmijas šūnu līnija, kas izveidota no perifērās asinis pieaugušai sievietei, kurai diagnosticēta agresīva NK šūnu leikēmija. Šūnu līnija tika iegūta sākotnējās diagnozes laikā un pārstāv Epšteina-Barra vīrusa (EBV) negatīvu NK šūnu ļaundabīgu audzēju, atšķirībā no daudziem NK/T šūnu limfomas modeļiem, kas ir saistīti ar EBV. KHYG-1 šūnas aug suspensijā un uzrāda aktivētu NK šūnu citomorfoloģiskās un imunofenotipiskās īpašības, tostarp CD56 un citoplazmatiskā CD3ε ekspresiju, vienlaikus trūkstot virsmas CD3 un T šūnu receptoru gēnu pārkārtojumiem, kas atbilst patiesai NK šūnu cilts izcelsmei.

Molekulārās profilēšanas pētījumos KHYG-1 ir iekļauts NK šūnu malignitāšu genomiskajā un transkriptomiskajā analīzē. Ar masīvu salīdzinošo genomisko hibridizāciju un gēnu ekspresijas pētījumiem visās NK šūnu līnijās ir identificētas atkārtotas hromosomu anomālijas NK šūnu audzējos, piemēram, delēcijas, kas ietekmē 6q21, un izmaiņas, kas ietekmē audzēju supresoru ceļus. Atšķirībā no vairākām EBV-pozitīvām NK šūnu līnijām, KHYG-1 neuzrāda ATR gēna izmaiņas pilnās kodējošās zonas analīzēs, kas uzsver molekulāro heterogenitāti NK šūnu neoplazmās. Gēnu ekspresijas profilēšana ievieto KHYG-1 NK šūnu cilts klasterī, kam raksturīga NK asociēto receptoru un citotoksisko efektoru molekulu ekspresija un kas atšķiras no citotoksiskajām αβ un γδ T šūnu limfomām.

Funkcionāli KHYG-1 in vitro parāda interleikīna-2 atkarīgu proliferāciju un saglabā NK šūnām raksturīgo citotoksisko aktivitāti. Šī līnija ir plaši izmantota, lai pētītu signālu ceļus, kas ir kritiski NK šūnu izdzīvošanai un proliferācijai, tostarp aurora kināzes A un NOTCH ceļa komponentus, kā arī lai novērtētu potenciālos terapeitiskos inhibitorus, kas vērsti pret NK šūnu ļaundabīgajiem audzējiem. Kā EBV negatīvs agresīvas NK šūnu leikēmijas modelis, KHYG-1 nodrošina vērtīgu in vitro sistēmu, lai pētītu NK šūnu transformācijas iekšējos onkogēnos mehānismus, kas nav atkarīgi no vīrusu izraisītas limfomģenēzes.

Audums
Perifērās asinis
Slimība
Dabisko slepkavju šūnu limfoblastiskā leikēmija/limfoma
Sinonīmi
  • KHYG1
  • KHYG

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
limfocītu līdzīgs
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
24–48 stundas; ~30–40 stundas; ~54 stundas, ~30 stundas, ~25 stundas

04Identifikatori

Atsauce
KHYG-1 (Cytion kataloga numurs 305890)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2976

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: p.Gly12Ala, nenoteikta; Mutācija: p.Arg248Trp, nenoteikta

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10 % siltuma inaktivētu FBS un 10 ng/ml IL-2.
Disociācijas reaģents
Neviens
Sadalījuma attiecība
Dalīt 1/4 ik pēc 3-4 dienām.
Šķidruma atjaunošana
Vienkārša atšķaidīšana suspensijas šūnu kultūras dēļ. Katru 3–4 dienu veikt subkultūru ar sadalījuma attiecību = 1/4.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
45 gadi
Etniskā piederība
Japāņu