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KHYG-1
Tecido
Sangue periférico
Doença
Leucemia/linfoma linfoblástico de células natural killer
Sinónimos
KHYG1, KHYG

Documentos

KHYG-1

Cell line · Número do produto 305890

KHYG-1 is a human natural killer (NK) cell leukemia cell line established from the peripheral blood of an adult female patient diagnosed with aggressive N...

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01Informações gerais

Descrição

KHYG-1 é uma linha celular de leucemia de células natural killer (NK) humanas estabelecida a partir do sangue periférico de uma paciente adulta diagnosticada com leucemia agressiva de células NK. A linha celular foi derivada no diagnóstico inicial e representa uma malignidade de células NK negativa para o vírus Epstein-Barr (EBV), distinguindo-a de muitos modelos de linfoma de células NK/T associados ao EBV. As células KHYG-1 crescem em suspensão e apresentam as características citomorfológicas e imunofenotípicas das células NK ativadas, incluindo a expressão de CD56 e CD3ε citoplasmático, embora não apresentem CD3 de superfície e rearranjos do gene do recetor de células T, o que é consistente com a verdadeira derivação da linhagem de células NK.

Estudos de perfil molecular incluíram KHYG-1 em análises genómicas e transcriptómicas de neoplasias malignas de células NK. Estudos de hibridização genómica comparativa em matriz e de expressão gênica em linhas de células NK identificaram anomalias cromossómicas recorrentes em tumores de células NK, tais como deleções envolvendo 6q21 e alterações que afetam as vias supressoras de tumores. Em contraste com várias linhas de células NK positivas para EBV, o KHYG-1 não apresenta alterações detectáveis no gene ATR em análises da região codificante completa, ressaltando a heterogeneidade molecular dentro das neoplasias de células NK. O perfil de expressão gênica coloca o KHYG-1 dentro do cluster da linhagem de células NK, caracterizado pela expressão de receptores associados a NK e moléculas efetoras citotóxicas, e distinto dos linfomas citotóxicos de células T αβ e γδ.

Funcionalmente, a KHYG-1 exibe proliferação dependente de interleucina-2 in vitro e mantém a atividade citotóxica típica das células NK. A linha tem sido amplamente utilizada para investigar vias de sinalização críticas para a sobrevivência e proliferação das células NK, incluindo a aurora quinase A e os componentes da via NOTCH, bem como para avaliar inibidores terapêuticos candidatos que têm como alvo as neoplasias malignas das células NK. Como um modelo EBV-negativo de leucemia agressiva de células NK, o KHYG-1 fornece um valioso sistema in vitro para o estudo de mecanismos oncogênicos intrínsecos na transformação das células NK, independente da linfomagênese induzida por vírus.

Tecido
Sangue periférico
Doença
Leucemia/linfoma linfoblástico de células natural killer
Sinónimos
  • KHYG1
  • KHYG

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
semelhante a linfócito
Tempo de duplicação
24-48 horas; ~30-40 horas; ~54 horas, ~30 horas, ~25 horas

04Identificadores

Referência
KHYG-1 (número de catálogo Cytion 305890)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2976

05Expressão e suscetibilidade

Perfil mutacional
Mutação: p.Gly12Ala, não especificada; Mutação: p.Arg248Trp, não especificada

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 10% de FBS inativado por calor e 10 ng/ml de IL-2.
Reagente de dissociação
Nenhum
Rácio de divisão
Divida 1/4 a cada 3-4 dias.
Renovação de fluidos
Diluição simples devido à cultura de células em suspensão. Subcultura a cada 3-4 dias com proporção de divisão = 1/4.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controlo de qualidade e criopreservação

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
45 anos
Etnia
Japonês