Přejít na obsah
KHYG-1
Tkáň
Periferní krev
Nemoc
Lymfoblastická leukémie/lymfom z přirozených zabíječských buněk
Synonyma
KHYG1, KHYG

Dokumenty

KHYG-1

Cell line · Číslo výrobku 305890

KHYG-1 is a human natural killer (NK) cell leukemia cell line established from the peripheral blood of an adult female patient diagnosed with aggressive N...

€500.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

KHYG-1 je lidská buněčná linie leukémie přirozených zabíječských buněk (NK), vytvořená z periferní krve dospělé pacientky s diagnózou agresivní leukémie NK buněk. Buněčná linie byla odvozena při počáteční diagnóze a představuje malignitu NK buněk negativní na virus Epstein-Barr (EBV), což ji odlišuje od mnoha modelů lymfomu NK/T buněk, které jsou spojeny s EBV. Buňky KHYG-1 rostou v suspenzi a vykazují cytomorfologické a imunofenotypové charakteristiky aktivovaných NK buněk, včetně exprese CD56 a cytoplazmatického CD3ε, přičemž postrádají povrchové CD3 a genové přestavby T-buněčných receptorů, což je v souladu s odvozením od skutečné NK buněčné linie.

Studie molekulárního profilování zahrnuly KHYG-1 do genomických a transkriptomických analýz malignit NK buněk. Studie srovnávací genomické hybridizace a genové exprese napříč NK buněčnými liniemi identifikovaly opakující se chromozomální abnormality v nádorech NK buněk, jako jsou delece zahrnující 6q21 a alterace ovlivňující nádorové supresorové dráhy. Na rozdíl od několika EBV-pozitivních NK buněčných linií nevykazuje KHYG-1 v analýzách celé kódující oblasti žádné detekovatelné změny genu ATR, což podtrhuje molekulární heterogenitu v rámci neoplazmat NK buněk. Profilování genové exprese zařazuje KHYG-1 do klastru NK buněčné linie, který se vyznačuje expresí receptorů asociovaných s NK a cytotoxickými efektorovými molekulami a odlišuje se od cytotoxických αβ a γδ T-buněčných lymfomů.

Funkčně vykazuje KHYG-1 in vitro proliferaci závislou na interleukinu-2 a zachovává si cytotoxickou aktivitu typickou pro NK buňky. Tato linie byla široce používána k výzkumu signálních drah kritických pro přežití a proliferaci NK buněk, včetně komponent drah aurora kinázy A a NOTCH, jakož i k hodnocení kandidátů na terapeutické inhibitory zaměřené na malignity NK buněk. Jako EBV-negativní model agresivní leukémie NK buněk poskytuje KHYG-1 cenný in vitro systém pro studium vnitřních onkogenních mechanismů v transformaci NK buněk, nezávislý na virově řízené lymfomogenezi.

Tkáň
Periferní krev
Nemoc
Lymfoblastická leukémie/lymfom z přirozených zabíječských buněk
Synonyma
  • KHYG1
  • KHYG

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
lymfocytový
Doba zdvojnásobení
24–48 hodin; ~30–40 hodin; ~54 hodin, ~30 hodin, ~25 hodin

04Identifikátory

Citace
KHYG-1 (katalogové číslo Cytion 305890)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2976

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: p.Gly12Ala, nespecifikovaná; Mutace: p.Arg248Trp, nespecifikovaná

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium 10 % tepelně inaktivovaným FBS a 10 ng/ml IL-2.
Disociační činidlo
Žádný
Poměr rozdělení
Rozdělte na 1/4 každé 3–4 dny.
Obnova tekutin
Jednoduché ředění kvůli kultivaci suspenzních buněk. Subkultura každé 3–4 dny s poměrem dělení = 1/4.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
45 let
Etnická příslušnost
Japonský