Przejdź do treści
MKN-45
Chusteczka
Żołądek
Choroba
Gruczolakorak żołądka
Miejsce przerzutów
Wątroba
Synonimy
MKN 45, MKN45

Dokumenty

MKN-45

Cell line · Numer produktu 300489

The MKN-45 cell line is a human gastric cancer cell line, derived from the poorly differentiated adenocarcinoma of the stomach. These cells exhibit charac...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa MKN-45 to ludzka linia komórkowa raka żołądka, pochodząca ze słabo zróżnicowanego gruczolakoraka żołądka. Komórki te wykazują cechy typowe dla raka żołądka, w tym szybki wzrost i wysoki stopień niestabilności genetycznej. Komórki MKN-45 są powszechnie wykorzystywane w badaniach nad nowotworami do badania biologii nowotworów, mechanizmów oporności na leki i szlaków molekularnych zaangażowanych w progresję raka żołądka. Ich zdolność do tworzenia guzów po ksenoprzeszczepieniu do myszy z obniżoną odpornością czyni je cennym modelem do badań in vivo.

Komórki MKN-45 mają charakter nabłonkowy i rosną w hodowli jako komórki przylegające. Wykazują ekspresję różnych biomarkerów związanych z rakiem żołądka, takich jak antygen rakowo-płodowy (CEA) i E-kadheryna, dzięki czemu są przydatne w badaniach diagnostycznych i terapeutycznych. Ponadto, komórki MKN-45 są często wykorzystywane do oceny leków chemioterapeutycznych i terapii celowanych ze względu na ich reaktywność na leczenie i zdolność do naśladowania klinicznego zachowania ludzkich guzów żołądka. Naukowcy wykorzystują również tę linię komórkową do badania skutków modyfikacji genetycznych i opracowywania nowych strategii terapeutycznych mających na celu poprawę wyników leczenia pacjentów z rakiem żołądka.

Chusteczka
Żołądek
Choroba
Gruczolakorak żołądka
Miejsce przerzutów
Wątroba
Synonimy
  • MKN 45
  • MKN45

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Adhezja i zawiesina
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Identyfikatory

Źródło
MKN-45 (numer katalogowy Cytion 300489)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0434

04Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże o 20% FBS inaktywowanego termicznie
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Zebrać komórki zawiesiny do probówki o pojemności 15 ml i delikatnie przemyć przylegające komórki PBS pozbawionym wapnia i magnezu (użyć 3-5 ml dla kolb T25 i 5-10 ml dla kolb T75). Nałożyć Accutase (1-2 ml na kolby T25, 2,5 ml na kolby T75), zapewniając pełne pokrycie warstwy komórek. Pozostawić komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 10 minut. Po inkubacji połączyć i odwirować zarówno zawiesinę, jak i przylegające komórki. Po odwirowaniu ostrożnie zawiesić osad komórek i przenieść zawiesinę komórek do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

06Darczyńca

Wiek dawcy
62 lata
Pochodzenie etniczne
Japoński