Pāriet uz saturu
MKN-45
Audums
Kuņģis
Slimība
Kuņģa adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Aknas
Sinonīmi
MKN 45, MKN45

Dokumenti

MKN-45

Cell line · Preces numurs 300489

The MKN-45 cell line is a human gastric cancer cell line, derived from the poorly differentiated adenocarcinoma of the stomach. These cells exhibit charac...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MKN-45 šūnu līnija ir cilvēka kuņģa vēža šūnu līnija, kas iegūta no vāji diferencētas kuņģa adenokarcinomas. Šīm šūnām piemīt kuņģa vēzim raksturīgas īpašības, tostarp strauja augšana un augsta ģenētiskās nestabilitātes pakāpe. MKN-45 šūnas parasti izmanto vēža pētījumos, lai pētītu audzēja bioloģiju, rezistences pret zālēm mehānismus un molekulāros ceļus, kas saistīti ar kuņģa vēža progresēšanu. To spēja veidot audzējus, ja tās ksenogrāfē imūnkompromitētām pelēm, padara tās par vērtīgu in vivo pētījumu modeli.

MKN-45 šūnas pēc būtības ir epitēlijķermenīši, un kultūrā tās aug kā adherējošas šūnas. Tās ekspresē dažādus ar kuņģa vēzi saistītus biomarķierus, piemēram, karcīnoembrionālo antigēnu (CEA) un E-kadherīnu, tādējādi tās ir noderīgas diagnostikas un terapeitiskiem pētījumiem. Turklāt MKN-45 šūnas bieži izmanto ķīmijterapijas zāļu un mērķterapijas novērtēšanā, jo tās reaģē uz ārstēšanu un spēj imitēt cilvēka kuņģa audzēju klīnisko uzvedību. Pētnieki šo šūnu līniju izmanto arī, lai pētītu ģenētisko modifikāciju ietekmi un izstrādātu jaunas terapeitiskās stratēģijas, kuru mērķis ir uzlabot pacientu iznākumu kuņģa vēža gadījumā.

Audums
Kuņģis
Slimība
Kuņģa adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Aknas
Sinonīmi
  • MKN 45
  • MKN45

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Adhēzija un suspensija
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Identifikatori

Atsauce
MKN-45 (Cytion kataloga numurs 300489)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0434

04Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 20 % termiski inaktivētu FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un saudzīgi izmazgā pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmanto 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 10 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

06Ziedotājs

Donora vecums
62 gadi
Etniskā piederība
Japāņu