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MKN-45
Tecido
Estômago
Doença
Adenocarcinoma gástrico
Local da metástase
Fígado
Sinónimos
MKN 45, MKN45

Documentos

MKN-45

Cell line · Número do produto 300489

The MKN-45 cell line is a human gastric cancer cell line, derived from the poorly differentiated adenocarcinoma of the stomach. These cells exhibit charac...

€430.00sem impostos nem portes de envio

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular MKN-45 é uma linha celular de cancro gástrico humano, derivada do adenocarcinoma pouco diferenciado do estômago. Estas células apresentam caraterísticas típicas do cancro gástrico, incluindo um crescimento rápido e um elevado grau de instabilidade genética. As células MKN-45 são normalmente utilizadas na investigação do cancro para estudar a biologia tumoral, os mecanismos de resistência aos medicamentos e as vias moleculares envolvidas na progressão do cancro gástrico. A sua capacidade de formar tumores quando xenoenxertadas em ratinhos imunocomprometidos torna-as um modelo valioso para estudos in vivo.

As células MKN-45 são de natureza epitelial e crescem como células aderentes em cultura. Expressam vários biomarcadores relevantes para o cancro gástrico, como o antigénio carcinoembrionário (CEA) e a E-caderina, o que as torna úteis para a investigação diagnóstica e terapêutica. Além disso, as células MKN-45 são frequentemente utilizadas na avaliação de fármacos de quimioterapia e de terapias direcionadas devido à sua capacidade de resposta ao tratamento e à sua capacidade de imitar o comportamento clínico dos tumores gástricos humanos. Os investigadores também utilizam esta linha celular para explorar os efeitos das modificações genéticas e para desenvolver novas estratégias terapêuticas destinadas a melhorar os resultados dos doentes com cancro gástrico.

Tecido
Estômago
Doença
Adenocarcinoma gástrico
Local da metástase
Fígado
Sinónimos
  • MKN 45
  • MKN45

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Adesão e suspensão
Nível de biossegurança
1

03Identificadores

Referência
MKN-45 (número de catálogo Cytion 300489)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0434

04Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 20% de FBS inactivado pelo calor
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Reunir as células em suspensão num tubo de 15 ml e lavar suavemente as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (utilizar 3-5 ml para os frascos T25 e 5-10 ml para os frascos T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para os frascos T25, 2,5 ml para os frascos T75), assegurando a cobertura total da camada celular. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 10 minutos. Após a incubação, combinar e centrifugar tanto a suspensão como as células aderentes. Após a centrifugação, ressuspender cuidadosamente o pellet de células e transferir a suspensão de células para novos frascos com meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

06Doador

Idade do dador
62 anos
Etnia
Japonês