Skip to content
MKN-45
Tissue
กระเพาะอาหาร
Disease
มะเร็งต่อมน้ำเหลืองในกระเพาะอาหาร
Metastatic site
ตับ
Synonyms
MKN 45, MKN45

Documents

MKN-45

Cell line · Product number 300489

The MKN-45 cell line is a human gastric cancer cell line, derived from the poorly differentiated adenocarcinoma of the stomach. These cells exhibit charac...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ MKN-45 เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งกระเพาะอาหารของมนุษย์ ซึ่งได้มาจากมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดไม่ดีของกระเพาะอาหาร เซลล์เหล่านี้มีลักษณะเฉพาะที่พบได้ทั่วไปในมะเร็งกระเพาะอาหาร รวมถึงการเจริญเติบโตอย่างรวดเร็วและความไม่เสถียรทางพันธุกรรมในระดับสูงเซลล์ MKN-45 มักถูกใช้ในงานวิจัยมะเร็งเพื่อศึกษาชีววิทยาของเนื้องอก กลไกการดื้อยา และเส้นทางโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการลุกลามของมะเร็งกระเพาะอาหาร ความสามารถในการก่อตัวเป็นเนื้องอกเมื่อปลูกถ่ายในหนูที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่องทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาในสิ่งมีชีวิต

เซลล์ MKN-45 มีลักษณะเป็นเซลล์เยื่อบุผิวและเจริญเติบโตเป็นเซลล์ที่เกาะติดกันในวัฒนธรรมเซลล์ พวกมันแสดงออกของตัวบ่งชี้ทางชีวภาพหลายชนิดที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งกระเพาะอาหาร เช่น แอนติเจนคาร์ซิโนเอ็มบริโอนิก (CEA) และ E-cadherin ทำให้เซลล์เหล่านี้มีประโยชน์ในการวิจัยเพื่อการวินิจฉัยและการรักษานอกจากนี้ เซลล์ MKN-45 ยังถูกนำมาใช้บ่อยในการประเมินประสิทธิภาพของยาเคมีบำบัดและการรักษาแบบมุ่งเป้า เนื่องจากเซลล์เหล่านี้ตอบสนองต่อการรักษาได้ดีและมีความสามารถในการจำลองพฤติกรรมทางคลินิกของเนื้องอกในกระเพาะอาหารของมนุษย์ นักวิจัยยังใช้สายพันธุ์เซลล์นี้ในการศึกษาผลกระทบของการดัดแปลงพันธุกรรมและพัฒนาวิธีการรักษาใหม่ๆ ที่มุ่งปรับปรุงผลลัพธ์ของผู้ป่วยโรคมะเร็งกระเพาะอาหาร

Tissue
กระเพาะอาหาร
Disease
มะเร็งต่อมน้ำเหลืองในกระเพาะอาหาร
Metastatic site
ตับ
Synonyms
  • MKN 45
  • MKN45

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
MKN-45 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300489)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0434

04Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS ที่ผ่านการทำให้ไม่มีความสามารถในการติดเชื้อด้วยความร้อน 20%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
รวบรวมเซลล์ที่ลอยในหลอดขนาด 15 มิลลิลิตร และล้างเซลล์ที่ติดผนังอย่างเบามือด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (ใช้ 3-5 มิลลิลิตรสำหรับขวด T25 และ 5-10 มิลลิลิตรสำหรับขวด T75)นำ Accutase (1-2 มล. สำหรับขวด T25, 2.5 มล. สำหรับขวด T75) ใส่ให้ทั่วชั้นเซลล์อย่างทั่วถึง ปล่อยให้เซลล์พักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที หลังจากนั้นรวมและปั่นเหวี่ยงทั้งเซลล์แขวนลอยและเซลล์ที่เกาะติด หลังจากปั่นเหวี่ยงแล้ว ให้นำเซลล์ที่ตกตะกอนมาแขวนลอยอย่างระมัดระวังและถ่ายเซลล์แขวนลอยไปยังขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

06Donor

Donor age
62 ปี
Ethnicity
ญี่ปุ่น