Mine otse sisu juurde
MKN-45
Kude
Maha
Haigus
Mao adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Maksa
Sünonüümid
MKN 45, MKN45

Dokumendid

MKN-45

Cell line · Toote number 300489

The MKN-45 cell line is a human gastric cancer cell line, derived from the poorly differentiated adenocarcinoma of the stomach. These cells exhibit charac...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MKN-45 rakuliin on inimese maovähi rakuliin, mis on saadud halvasti diferentseerunud mao adenokartsinoomist. Nendel rakkudel on maovähile iseloomulikud omadused, sealhulgas kiire kasv ja suur geneetiline ebastabiilsus. MKN-45 rakke kasutatakse tavaliselt vähiuuringutes, et uurida kasvaja bioloogiat, ravimresistentsuse mehhanisme ja maovähi progresseerumisega seotud molekulaarseid radu. Nende võime moodustada tuumoreid, kui neid ksenotransplanteeritakse immuunpuudulikkusega hiirtesse, muudab nad väärtuslikuks mudeliks in vivo uuringuteks.

MKN-45 rakud on oma olemuselt epiteliaalsed ja kasvavad kultuuris adherentsete rakkudena. Nad ekspresseerivad mitmeid maovähi jaoks olulisi biomarkereid, nagu kartsinoembüooniline antigeen (CEA) ja E-kadheriin, mistõttu on nad kasulikud diagnostilistes ja terapeutilistes uuringutes. Lisaks kasutatakse MKN-45 rakke sageli keemiaravimite ja sihtotstarbeliste ravimeetodite hindamisel, kuna nad reageerivad ravile ja suudavad jäljendada inimese maokasvajate kliinilist käitumist. Teadlased kasutavad seda rakuliini ka geneetiliste modifikatsioonide mõju uurimiseks ja uute ravistrateegiate väljatöötamiseks, mille eesmärk on parandada patsientide tulemusi maovähi puhul.

Kude
Maha
Haigus
Mao adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Maksa
Sünonüümid
  • MKN 45
  • MKN45

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Adhesiivne ja suspensioon
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
MKN-45 (Cytioni katalooginumber 300489)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0434

04Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendatakse keskkonda 20% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel 10 minutit toatemperatuuril inkubeerida. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

06Annetaja

Doonori vanus
62 aastat
Etniline kuuluvus
Jaapani