Siirry sisältöön
MKN-45
Kudos
Vatsa
Sairaus
Mahalaukun adenokarsinooma
Metastaasikohde
Maksa
Synonyymit
MKN 45, MKN45

Asiakirjat

MKN-45

Cell line · Tuotenumero 300489

The MKN-45 cell line is a human gastric cancer cell line, derived from the poorly differentiated adenocarcinoma of the stomach. These cells exhibit charac...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MKN-45-solulinja on ihmisen mahasyöpäsolulinja, joka on peräisin huonosti erilaistuneesta mahalaukun adenokarsinoomasta. Näillä soluilla on mahasyövälle tyypillisiä ominaisuuksia, kuten nopea kasvu ja suuri geneettinen epävakaus. MKN-45-soluja käytetään yleisesti syöpätutkimuksessa kasvaimen biologian, lääkeresistenssimekanismien ja mahasyövän etenemiseen liittyvien molekyylireittien tutkimiseen. Niiden kyky muodostaa kasvaimia, kun ne siirretään immuunipuutteisiin hiiriin, tekee niistä arvokkaan mallin in vivo -tutkimuksiin.

MKN-45-solut ovat luonteeltaan epiteelisoluja, ja ne kasvavat viljelyssä tarttuvina soluina. Ne ilmentävät erilaisia mahasyövän kannalta merkityksellisiä biomarkkereita, kuten karsinoembryonista antigeenia (CEA) ja E-kadheriinia, minkä vuoksi ne ovat hyödyllisiä diagnostisessa ja terapeuttisessa tutkimuksessa. Lisäksi MKN-45-soluja käytetään usein kemoterapialääkkeiden ja kohdennettujen hoitojen arvioinnissa, koska ne reagoivat hoitoon ja pystyvät jäljittelemään ihmisen mahakasvainten kliinistä käyttäytymistä. Tutkijat käyttävät tätä solulinjaa myös geneettisten muutosten vaikutusten tutkimiseen ja uusien hoitostrategioiden kehittämiseen, joilla pyritään parantamaan mahasyövän hoitotuloksia.

Kudos
Vatsa
Sairaus
Mahalaukun adenokarsinooma
Metastaasikohde
Maksa
Synonyymit
  • MKN 45
  • MKN45

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Adheesio ja suspensio
Bioturvallisuustaso
1

03Tunnisteet

Lähdeviite
MKN-45 (Cytionin luettelonumero 300489)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0434

04Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 20 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Kerää suspensiosolut 15 ml:n putkeen ja pese kiinni olevat solut varovasti PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml T25-pulloissa ja 5-10 ml T75-pulloissa). Levitä Accutasea (1-2 ml T25-pulloihin, 2,5 ml T75-pulloihin) varmistaen, että solukerros peittyy kokonaan. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 10 minuuttia. Inkuboinnin jälkeen yhdistetään ja sentrifugoidaan sekä suspensio että adherentit solut. Sentrifugoinnin jälkeen solupelletti suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensio uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

06Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
62 vuotta
Etnisyys
Japanilainen