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MKN-45
Gewebe
Magen
Krankheit
Adenokarzinom des Magens
Metastasenherd
Leber
Synonyme
MKN 45, MKN45

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MKN-45

Cell line · Artikelnummer 300489

The MKN-45 cell line is a human gastric cancer cell line, derived from the poorly differentiated adenocarcinoma of the stomach. These cells exhibit charac...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die MKN-45-Zelllinie ist eine menschliche Magenkrebs-Zelllinie, die von einem wenig differenzierten Adenokarzinom des Magens abstammt. Diese Zellen weisen typische Merkmale von Magenkrebs auf, darunter schnelles Wachstum und ein hohes Maß an genetischer Instabilität. MKN-45-Zellen werden in der Krebsforschung häufig verwendet, um die Tumorbiologie, die Mechanismen der Arzneimittelresistenz und die molekularen Signalwege zu untersuchen, die am Fortschreiten von Magenkrebs beteiligt sind. Ihre Fähigkeit, Tumore zu bilden, wenn sie in immungeschwächte Mäuse xenotransplantiert werden, macht sie zu einem wertvollen Modell für In-vivo-Studien.

MKN-45-Zellen sind von Natur aus epithelial und wachsen als adhärente Zellen in Kultur. Sie exprimieren verschiedene Biomarker, die für Magenkrebs relevant sind, wie z. B. carcinoembryonales Antigen (CEA) und E-Cadherin, was sie für die diagnostische und therapeutische Forschung nützlich macht. Darüber hinaus werden MKN-45-Zellen häufig für die Bewertung von Chemotherapeutika und zielgerichteten Therapien verwendet, da sie auf die Behandlung ansprechen und das klinische Verhalten menschlicher Magentumore nachahmen. Forscher nutzen diese Zelllinie auch, um die Auswirkungen genetischer Veränderungen zu erforschen und neue therapeutische Strategien zu entwickeln, die den Erfolg von Patienten mit Magenkrebs verbessern sollen.

Gewebe
Magen
Krankheit
Adenokarzinom des Magens
Metastasenherd
Leber
Synonyme
  • MKN 45
  • MKN45

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Adhärente und Suspension
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Bezeichner

Quellenangabe
MKN-45 (Cytion-Katalognummer 300489)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0434

04Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 20% hitzeinaktiviertem FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Die Suspensionszellen in einem 15-ml-Röhrchen sammeln und die anhaftenden Zellen vorsichtig mit PBS ohne Kalzium und Magnesium waschen (3-5 ml für T25-Kolben und 5-10 ml für T75-Kolben verwenden). Accutase auftragen (1-2 ml für T25-Kolben, 2,5 ml für T75-Kolben), um sicherzustellen, dass die Zellschicht vollständig bedeckt ist. Die Zellen 10 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubieren lassen. Nach der Inkubation sowohl die Suspension als auch die adhärenten Zellen mischen und zentrifugieren. Nach der Zentrifugation das Zellpellet vorsichtig resuspendieren und die Zellsuspension in neue Flaschen mit frischem Medium überführen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

06Spender

Alter des Spenders
62 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Japanisch