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MKN-45
Tessuto
Stomaco
Malattia
Adenocarcinoma gastrico
Sito metastatico
Fegato
Sinonimi
MKN 45, MKN45

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MKN-45

Cell line · Codice prodotto 300489

The MKN-45 cell line is a human gastric cancer cell line, derived from the poorly differentiated adenocarcinoma of the stomach. These cells exhibit charac...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare MKN-45 è una linea cellulare di cancro gastrico umano, derivata dall'adenocarcinoma dello stomaco scarsamente differenziato. Queste cellule presentano caratteristiche tipiche del cancro gastrico, tra cui una crescita rapida e un alto grado di instabilità genetica. Le cellule MKN-45 sono comunemente utilizzate nella ricerca sul cancro per studiare la biologia del tumore, i meccanismi di resistenza ai farmaci e le vie molecolari coinvolte nella progressione del cancro gastrico. La loro capacità di formare tumori quando vengono xenotrapiantate in topi immunocompromessi le rende un modello prezioso per gli studi in vivo.

Le cellule MKN-45 sono di natura epiteliale e crescono in coltura come cellule aderenti. Esprimono vari biomarcatori rilevanti per il cancro gastrico, come l'antigene carcinoembrionale (CEA) e la E-caderina, che le rendono utili per la ricerca diagnostica e terapeutica. Inoltre, le cellule MKN-45 sono spesso utilizzate nella valutazione di farmaci chemioterapici e terapie mirate, grazie alla loro reattività al trattamento e alla capacità di imitare il comportamento clinico dei tumori gastrici umani. I ricercatori utilizzano questa linea cellulare anche per esplorare gli effetti delle modifiche genetiche e per sviluppare nuove strategie terapeutiche volte a migliorare i risultati dei pazienti nel cancro gastrico.

Tessuto
Stomaco
Malattia
Adenocarcinoma gastrico
Sito metastatico
Fegato
Sinonimi
  • MKN 45
  • MKN45

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente e in sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Identificatori

Riferimento bibliografico
MKN-45 (numero di catalogo Cytion 300489)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0434

04Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 20% di FBS inattivato termicamente
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Raccogliere le cellule in sospensione in una provetta da 15 ml e lavare delicatamente le cellule aderenti con PBS privo di calcio e magnesio (utilizzare 3-5 ml per le fiasche T25 e 5-10 ml per le fiasche T75). Applicare Accutase (1-2 ml per le beute T25, 2,5 ml per le beute T75) assicurando la copertura completa dello strato cellulare. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 10 minuti. Dopo l'incubazione, unire e centrifugare sia la sospensione che le cellule aderenti. Dopo la centrifugazione, risospendere accuratamente il pellet cellulare e trasferire la sospensione cellulare in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

06Donatore

Età dei donatori
62 anni
Etnia
Giapponese