Prejsť na obsah
U-138 MG
Tkanivo
Mozog
Choroba
Astrocytóm
Miesto metastáz
Neplatí (primárny intrakraniálny nádor; bez vzdialených metastáz)
Synonymá
U-138MG, U-138-MG, U138-MG, U 138 MG, U138MG, U138, 138 MG, 138MG

Dokumenty

U-138 MG

Cell line · Číslo výrobku 300363

This is one of a number of cell lines derived from malignant gliomas, e.g. U-87-MG, U-118-MG and U-373-MG isolated by J. Ponten and associates from 1966 to 1...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis
Ide o jednu z mnohých bunkových línií odvodených od malígnych gliómov, napríklad U-87-MG, U-118-MG a U-373-MG, ktoré izoloval J. Ponten a jeho spolupracovníci v rokoch 1966 až 1969. Od U-87-MG sa líši morfológiou a má pomalšiu rýchlosť proliferácie. U-138-MG vykazuje veľkú podobnosť s U-118-MG, pričom má spoločných najmenej šesť odvodených markerových chromozómov.
Tkanivo
Mozog
Choroba
Astrocytóm
Miesto metastáz
Neplatí (primárny intrakraniálny nádor; bez vzdialených metastáz)
Aplikácie
Výskum glioblastómu/astrocytómu; biológia gliových nádorov; citlivosť na ožiarenie; hodnotenie chemoterapie; porovnanie s U-118 MG (spoločné markerové chromozómy); štúdie signálnych dráh NF-κB a EGFR
Synonymá
  • U-138MG
  • U-138-MG
  • U138-MG
  • U 138 MG
  • U138MG
  • U138
  • 138 MG
  • 138MG

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o štatúte GMO
No genetic modification; wildtype glioma cell line isolated by J. Ponten et al. (1966–1969)
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Polygonálne
Typ bunky
Gliové bunky (astrocytové)
Karyotyp
Hyperdiploidný až pentaploidný s niekoľkými markermi, počet kmeňových chromozómov je blízky triploidnému, pričom zložka 2S sa vyskytuje na úrovni 9,8 %. Päť markerov [t(11,5), t(8q,4), t(19,?18), M1 a M2] bolo spoločných pre väčšinu metafáz S. Jeden chromozóm 4 sa nachádzal v každej metafáze S. Zloženie chromozómov bolo medzi bunkami veľmi rovnomerné. Produkt frekvencie fenotypov: 0.0511
Doba zdvojnásobenia
približne 48 až 72 hodín (pomalšia rýchlosť proliferácie ako v prípade U-118 MG)

04Identifikátory

Citácia
U-138 MG (katalógové číslo Cytion 300363)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0020

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
Krvná skupina A, Rh+
Izoenzýmy
Me-2, 1, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Pomer rozdelenia
1 až 3
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky na kultivačné misky v hustote 5 × 10⁴ buniek/cm² a pred prvou výmenou živného média počkajte aspoň 24 hodín, aby sa bunky priľnuli.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame 50 % bazálne médium + 40 % FBS + 10 % DMSO alebo CM-1 (katalógové číslo Cytion 800100), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
47 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský