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U-138 MG
Tessuto
Cervello
Malattia
Astrocitoma
Sito metastatico
Non applicabile (tumore intracranico primario; assenza di metastasi a distanza)
Sinonimi
U-138MG, U-138-MG, U138-MG, U 138 MG, U138MG, U138, 138 MG, 138MG

Documenti

U-138 MG

Cell line · Codice prodotto 300363

This is one of a number of cell lines derived from malignant gliomas, e.g. U-87-MG, U-118-MG and U-373-MG isolated by J. Ponten and associates from 1966 to 1...

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1

01Informazioni generali

Descrizione
Si tratta di una delle linee cellulari derivate da gliomi maligni, come U-87-MG, U-118-MG e U-373-MG, isolate da J. Ponten e collaboratori tra il 1966 e il 1969. Si differenzia dall'U-87-MG per la morfologia e ha un tasso di proliferazione più lento. U-138-MG mostra una forte somiglianza con U-118-MG, condividendo almeno sei cromosomi marcatori derivati.
Tessuto
Cervello
Malattia
Astrocitoma
Sito metastatico
Non applicabile (tumore intracranico primario; assenza di metastasi a distanza)
Applicazioni
Ricerca sul glioblastoma/astrocitoma; biologia dei tumori gliali; sensibilità alle radiazioni; valutazione della chemioterapia; confronto con U-118 MG (cromosomi marcatori condivisi); studi sulle vie di segnalazione NF-κB ed EGFR
Sinonimi
  • U-138MG
  • U-138-MG
  • U138-MG
  • U 138 MG
  • U138MG
  • U138
  • 138 MG
  • 138MG

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
Senza OGM
Dettagli sullo stato degli OGM
No genetic modification; wildtype glioma cell line isolated by J. Ponten et al. (1966–1969)
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Poligonale
Tipo di cellula
Cellule gliali (astrociti)
Cariotipo
Da iperdiploide a pentaploide con diversi marcatori, il numero di cromosomi della linea staminale è quasi triploide con la componente 2S presente al 9,8%. Cinque marcatori [t(11,5), t(8q,4), t(19,?18), M1 e M2] erano comuni alla maggior parte delle metafasi S. Un cromosoma 4 poteva essere trovato in ogni metafase S. La composizione cromosomica era molto uniforme tra le cellule. Prodotto di frequenza del fenotipo: 0.0511
Tempo di raddoppio
circa da 48 a 72 ore (tasso di proliferazione più lento rispetto all’U-118 MG)

04Identificatori

Riferimento bibliografico
U-138 MG (numero di catalogo Cytion 300363)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0020

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
Gruppo sanguigno A, Rh+
Isoenzimi
Me-2, 1, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rapporto di frazionamento
da 1 a 3
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, seminare le cellule a una densità di 5 × 10⁴ cellule/cm² e attendere almeno 24 ore affinché aderiscano prima del primo cambio di terreno di coltura.
Scongelamento e coltura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo 50% di terreno basale + 40% di FBS + 10% di DMSO, o CM-1 (Cytion numero di catalogo 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crioindotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
47 anni
Etnia
Caucasico