İçeriğe atla
EBC-1
Doku
Akciğer
Hastalık
Skuamöz hücreli karsinom
Metastaz yeri
Cilt
Eş anlamlılar
EBC-1/original, EBC1

EBC-1

Cell line · Ürün numarası 305539

EBC-1 is a human lung squamous cell carcinoma cell line, primarily noted for its relevance in studying mechanisms related to lung cancer, particularly non...

€550.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

EBC-1, başta küçük hücreli dışı akciğer karsinomu (NSCLC) olmak üzere akciğer kanseri ile ilgili mekanizmaların incelenmesindeki önemi ile dikkat çeken bir insan akciğer skuamöz hücreli karsinom hücre hattıdır. Bu hücre hattı, tümör büyümesini ve tedaviye direnci yönlendiren onkojenik sinyal yolaklarında rol oynayan MET gen amplifikasyonu ile karakterize edilir. Tipik olarak hepatosit büyüme faktörü (HGF) tarafından indüklenen MET reseptör tirozin kinaz aktivasyonu, bu hücrelerin çoğalması, hayatta kalması ve metastazında önemli bir rol oynar. MET sinyalizasyonundaki anormallikler, EBC-1'in agresif tümör profilinde çok önemlidir ve bu da onu MET inhibisyonunu amaçlayan hedefe yönelik tedavileri incelemek için önemli bir model haline getirir.

EBC-1 hücrelerini kullanan araştırmalar, crizotinib gibi MET inhibitörlerine karşı çeşitli direnç mekanizmalarını araştırmıştır. Hücre hattı, PAI-1 upregülasyonu ve epitelyal-mezenkimal geçişi (EMT) içeren yolaklar aracılığıyla edinilmiş direnç göstererek terapötik zorluklara katkıda bulunmuştur. Ek olarak, sodyum bütiratın EBC-1 hücrelerinde gen ekspresyonunu modüle ettiği gösterilmiştir, bu da histon deasetilaz inhibitörlerinin gen transkripsiyonunu etkilemedeki potansiyel faydasına işaret etmektedir. Bu bulgular, EBC-1'in hem terapötik direnç araştırmalarındaki hem de MET-amplifiye akciğer kanserleri için yeni tedavi stratejilerinin geliştirilmesindeki öneminin altını çizmektedir.

Doku
Akciğer
Hastalık
Skuamöz hücreli karsinom
Metastaz yeri
Cilt
Eş anlamlılar
  • EBC-1/original
  • EBC1

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
EBC-1 (Cytion katalog numarası 305539)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_2891

04İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: DDR2, p.Thr681Ile (c.2042C>T), heterozigot; Mutasyon: EGFR, p.Leu858Arg (c.2573T>G), heterozigot; Mutasyon: TP53, p.Glu171Ter (c.511G>T), homozigot

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
69 yıl
Etnik köken
Tayvanlı