Mine otse sisu juurde
EBC-1
Kude
Kopsud
Haigus
Rakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Nahk
Sünonüümid
EBC-1/original, EBC1

Dokumendid

EBC-1

Cell line · Toote number 305539

EBC-1 is a human lung squamous cell carcinoma cell line, primarily noted for its relevance in studying mechanisms related to lung cancer, particularly non...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

EBC-1 on inimese kopsu lamerakk-kartsinoomi rakuliin, mis on tuntud eelkõige oma tähtsuse poolest kopsuvähiga seotud mehhanismide, eriti mitteväikerakk-kopsukartsinoomi (NSCLC) uurimisel. Seda rakuliini iseloomustab MET-geeni amplifikatsioon, mida on seostatud onkogeensete signaaliradadega, mis soodustavad kasvaja kasvu ja resistentsust ravi suhtes. MET retseptori türosiinkinaasi aktiveerimine, mida tavaliselt indutseerib hepatotsüütide kasvufaktor (HGF), mängib olulist rolli nende rakkude proliferatsioonis, ellujäämises ja metastaasis. Erinevused MET-signalisatsioonis on määrava tähtsusega EBC-1 agressiivse kasvajaprofiili puhul, mistõttu on see oluline mudel MET-i inhibeerimisele suunatud sihtotstarbeliste ravimeetodite uurimiseks.

EBC-1 rakke kasutades on uuritud erinevaid resistentsusmehhanisme MET-inhibiitorite, näiteks kritsotiniibi suhtes. Rakuliin on näidanud omandatud resistentsust PAI-1 ülereguleerimise ja epiteliaalse-mesenhümaalse ülemineku (EMT) kaudu, mis aitab kaasa terapeutiliste probleemide lahendamisele. Lisaks on näidatud, et naatriumbutüraat moduleerib geeniekspressiooni EBC-1 rakkudes, mis näitab histoondeatsetülaasi inhibiitorite võimalikku kasulikkust geenide transkriptsiooni mõjutamisel. Need leiud rõhutavad EBC-1 tähtsust nii terapeutilise resistentsuse uurimisel kui ka MET-amplitseeritud kopsuvähi uute ravistrateegiate väljatöötamisel.

Kude
Kopsud
Haigus
Rakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Nahk
Sünonüümid
  • EBC-1/original
  • EBC1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
EBC-1 (Cytioni katalooginumber 305539)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2891

04Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: DDR2, p.Thr681Ile (c.2042C>T), heterosügootne; Mutatsioon: DDR2, p.Thr681Ile (c.2042C>T), heterosügootne: EGFR, p.Leu858Arg (c.2573T>G), heterosügootne; Mutatsioon: TP53, p.Glu171Ter (c.511G>T), homosügootne

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
69 aastat
Etniline kuuluvus
Taiwani