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EBC-1
Tessuto
Polmone
Malattia
Carcinoma a cellule squamose
Sito metastatico
La pelle
Sinonimi
EBC-1/original, EBC1

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EBC-1

Cell line · Codice prodotto 305539

EBC-1 is a human lung squamous cell carcinoma cell line, primarily noted for its relevance in studying mechanisms related to lung cancer, particularly non...

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01Informazioni generali

Descrizione

EBC-1 è una linea cellulare di carcinoma polmonare a cellule squamose umano, nota soprattutto per la sua importanza nello studio dei meccanismi legati al cancro del polmone, in particolare al carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC). Questa linea cellulare è caratterizzata dall'amplificazione del gene MET, che è stato implicato nelle vie di segnalazione oncogeniche che guidano la crescita del tumore e la resistenza alla terapia. L'attivazione della tirosin-chinasi del recettore MET, tipicamente indotta dal fattore di crescita epatocitario (HGF), svolge un ruolo significativo nella proliferazione, nella sopravvivenza e nelle metastasi di queste cellule. Le aberrazioni nella segnalazione di MET sono fondamentali nel profilo aggressivo del tumore EBC-1, rendendolo un modello essenziale per lo studio di terapie mirate all'inibizione di MET.

La ricerca che utilizza le cellule EBC-1 ha esplorato vari meccanismi di resistenza agli inibitori di MET, come crizotinib. La linea cellulare ha dimostrato una resistenza acquisita attraverso vie che coinvolgono l'upregolazione di PAI-1 e la transizione epiteliale-mesenchimale (EMT), contribuendo alle sfide terapeutiche. Inoltre, è stato dimostrato che il butirrato di sodio modula l'espressione genica nelle cellule EBC-1, indicando la potenziale utilità degli inibitori dell'istone deacetilasi nell'influenzare la trascrizione genica. Questi risultati sottolineano l'importanza di EBC-1 sia nella ricerca sulla resistenza terapeutica che nello sviluppo di nuove strategie di trattamento per i tumori polmonari amplificati da MET.

Tessuto
Polmone
Malattia
Carcinoma a cellule squamose
Sito metastatico
La pelle
Sinonimi
  • EBC-1/original
  • EBC1

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Identificatori

Riferimento bibliografico
EBC-1 (numero di catalogo Cytion 305539)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2891

04Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: DDR2, p.Thr681Ile (c.2042C>T), eterozigote; Mutazione: EGFR, p.Leu858Arg (c.2573T>G), eterozigote; Mutazione: TP53, p.Glu171Ter (c.511G>T), omozigote

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
69 anni
Etnia
Taiwanese