Siirry sisältöön
EBC-1
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Okasolusyöpä
Metastaasikohde
Iho
Synonyymit
EBC-1/original, EBC1

Asiakirjat

EBC-1

Cell line · Tuotenumero 305539

EBC-1 is a human lung squamous cell carcinoma cell line, primarily noted for its relevance in studying mechanisms related to lung cancer, particularly non...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

EBC-1 on ihmisen keuhkojen levyepiteelisolusyöpäsolulinja, joka on ensisijaisesti tunnettu merkityksestään keuhkosyöpään liittyvien mekanismien, erityisesti ei-pienisoluisen keuhkosyövän (NSCLC), tutkimisessa. Tälle solulinjalle on ominaista MET-geenin monistuminen, jonka on todettu osallistuvan onkogeenisiin signaalireitteihin, jotka edistävät kasvaimen kasvua ja resistenssiä hoidolle. MET-reseptorin tyrosiinikinaasiaktivaatiolla, jonka tyypillisesti indusoi hepatosyyttikasvutekijä (HGF), on merkittävä rooli näiden solujen proliferaatiossa, eloonjäämisessä ja etäpesäkkeiden muodostumisessa. Poikkeavuudet MET-signaloinnissa ovat keskeisiä EBC-1:n aggressiivisessa kasvainprofiilissa, mikä tekee siitä olennaisen tärkeän mallin MET:n estoon tähtäävien kohdennettujen hoitojen tutkimiseen.

EBC-1-soluja hyödyntävässä tutkimuksessa on tutkittu erilaisia MET-inhibiittoreiden, kuten kritsotinibin, resistenssimekanismeja. Solulinja on osoittanut hankittua resistenssiä PAI-1:n ylössäätelyyn ja epiteelin ja mesenkyymin väliseen siirtymään (EMT) liittyvien reittien kautta, mikä lisää terapeuttisia haasteita. Lisäksi natriumbutyraatin on osoitettu muokkaavan geeniekspressiota EBC-1-soluissa, mikä osoittaa histonideasetylaasin estäjien mahdollisen hyödyllisyyden geenien transkriptioon vaikuttamisessa. Nämä havainnot korostavat EBC-1:n merkitystä sekä terapeuttisen resistenssin tutkimuksessa että uusien hoitostrategioiden kehittämisessä MET-amplifioituja keuhkosyöpiä varten.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Okasolusyöpä
Metastaasikohde
Iho
Synonyymit
  • EBC-1/original
  • EBC1

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Tunnisteet

Lähdeviite
EBC-1 (Cytionin luettelonumero 305539)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_2891

04Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: DDR2, p.Thr681Ile (c.2042C>T), heterotsygoottinen; Mutaatio: DDR2, p.Thr681Ile (c.2042C>T), heterotsygoottinen: EGFR, p.Leu858Arg (c.2573T>G), heterotsygoottinen; mutaatio: TP53, p.Glu171Ter (c.511G>T), homotsygoottinen

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
69 vuotta
Etnisyys
Taiwanilainen