Přejít na obsah
EBC-1
Tkáň
Plíce
Nemoc
Dlaždicobuněčný karcinom
Místo metastázy
Kůže
Synonyma
EBC-1/original, EBC1

Dokumenty

EBC-1

Cell line · Číslo výrobku 305539

EBC-1 is a human lung squamous cell carcinoma cell line, primarily noted for its relevance in studying mechanisms related to lung cancer, particularly non...

€550.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

EBC-1 je buněčná linie lidského dlaždicobuněčného karcinomu plic, která je známá především pro svůj význam při studiu mechanismů souvisejících s rakovinou plic, zejména nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC). Tato buněčná linie se vyznačuje amplifikací genu MET, který je zapojen do onkogenních signálních drah, jež podporují růst nádorů a rezistenci na léčbu. Aktivace tyrozinkinázy receptoru MET, typicky indukovaná hepatocytárním růstovým faktorem (HGF), hraje významnou roli v proliferaci, přežívání a metastazování těchto buněk. Aberace v signalizaci MET jsou klíčové pro agresivní nádorový profil EBC-1, což z něj činí zásadní model pro studium cílených terapií zaměřených na inhibici MET.

Výzkum využívající buňky EBC-1 zkoumal různé mechanismy rezistence vůči inhibitorům MET, jako je například crizotinib. Tato buněčná linie prokázala získanou rezistenci prostřednictvím cest zahrnujících regulaci PAI-1 a epiteliálně-mezenchymální přechod (EMT), což přispívá k terapeutickým problémům. Kromě toho bylo prokázáno, že butyrát sodný moduluje genovou expresi v buňkách EBC-1, což naznačuje potenciální užitečnost inhibitorů histonové deacetylázy při ovlivňování genové transkripce. Tato zjištění podtrhují význam EBC-1 jak ve výzkumu terapeutické rezistence, tak ve vývoji nových léčebných strategií pro rakovinu plic s amplifikací MET.

Tkáň
Plíce
Nemoc
Dlaždicobuněčný karcinom
Místo metastázy
Kůže
Synonyma
  • EBC-1/original
  • EBC1

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citace
EBC-1 (katalogové číslo Cytion 305539)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2891

04Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: Thr681Ile (c.2042C>T), heterozygotní; Mutace: DDR2, p.Thr681Ile (c.2042C>T), heterozygotní: Leu858Arg (c.2573T>G), heterozygotní; mutace: EGFR, p.Leu858Arg (c.2573T>G), heterozygotní: TP53, p.Glu171Ter (c.511G>T), homozygotní

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
69 let
Etnická příslušnost
Tchaj-wan