
- Tissue
- Poumon
- Disease
- Carcinome épidermoïde
- Metastatic site
- Peau
- Synonyms
- EBC-1/original, EBC1
Documents
EBC-1
Cell line · Product number 305539
EBC-1 is a human lung squamous cell carcinoma cell line, primarily noted for its relevance in studying mechanisms related to lung cancer, particularly non...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
EBC-1 est une lignée cellulaire de carcinome épidermoïde pulmonaire humain, principalement connue pour son intérêt dans l’étude des mécanismes liés au cancer du poumon, en particulier au carcinome pulmonaire à cellules non petites (CPNCP). Cette lignée cellulaire se caractérise par une amplification du gène MET, qui a été impliquée dans des voies de signalisation oncogéniques favorisant la croissance tumorale et la résistance au traitement. L’activation du récepteur tyrosine kinase MET, généralement induite par le facteur de croissance hépatocytaire (HGF), joue un rôle important dans la prolifération, la survie et la métastase de ces cellules. Les anomalies de la signalisation MET sont déterminantes dans le profil tumoral agressif de la lignée EBC-1, ce qui en fait un modèle essentiel pour l’étude des thérapies ciblées visant à inhiber MET.
Les recherches menées à l’aide des cellules EBC-1 ont permis d’explorer divers mécanismes de résistance aux inhibiteurs de MET, tels que le crizotinib. La lignée cellulaire a démontré une résistance acquise par le biais de voies impliquant la surexpression de PAI-1 et la transition épithélio-mésenchymateuse (TEM), ce qui complique les défis thérapeutiques. De plus, il a été démontré que le butyrate de sodium module l’expression génique dans les cellules EBC-1, ce qui indique l’utilité potentielle des inhibiteurs d’histone désacétylase pour influencer la transcription génique. Ces résultats soulignent l’importance de la lignée EBC-1 tant dans la recherche sur la résistance thérapeutique que dans le développement de nouvelles stratégies de traitement pour les cancers du poumon présentant une amplification du gène MET.
- Tissue
- Poumon
- Disease
- Carcinome épidermoïde
- Metastatic site
- Peau
- Synonyms
- EBC-1/original
- EBC1
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Identifiers
- Citation
- EBC-1 (numéro de catalogue Cytion 305539)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2891
04Expression and susceptibility
- Mutational profile
- Mutation : DDR2, p.Thr681Ile (c.2042C>T), hétérozygote; Mutation : EGFR, p.Leu858Arg (c.2573T>G), hétérozygote; Mutation : TP53, p.Glu171Ter (c.511G>T), homozygote
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter au milieu 10 % de FBS et 1 % de NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
07Donor
- Donor age
- 69 ans
- Ethnicity
- taïwanais
08Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes