İçeriğe atla
Human Mesenchymal Stem Cells, Adipose Tissue
Doku
Yağ Dokusu

Human Mesenchymal Stem Cells, Adipose Tissue

Cell line · Ürün numarası 300645

Human Mesenchymal Stem Cells (hMSCs) derived from adipose tissue are multipotent stromal cells capable of differentiating into various cell lineages, incl...

€690.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Adipoz dokudan elde edilen insan mezenkimal kök hücreleri (hMSC'ler), adipositler, osteoblastlar ve kondrositler dahil olmak üzere çeşitli hücre soylarına farklılaşabilen çok potansiyelli stromal hücrelerdir. Bu hücreler, diğer dokulara kıyasla mezenkimal kök hücrelerin zengin bir kaynağı olan adipoz dokunun stromal vasküler fraksiyonundan izole edilir. Yağ dokusundan elde edilen hMSC'ler, erişilebilirlikleri, izolasyon kolaylıkları ve daha yüksek verimleri nedeniyle araştırmalarda özellikle değerlidir ve bu da onları rejeneratif tıp, doku mühendisliği ve hücresel tedavi alanındaki çalışmalar için çok önemli bir araç haline getirir.

hMSC'ler, in vitro olarak çok çeşitli hücre tiplerine farklılaşmaya yönlendirilebilen, kendini yenileyen multipotent hücrelerdir. Bu hücrelerin adipositler, osteoblastlar ve kondrositlere doğrudan farklılaşması, spesifik farklılaşma ortamları kullanılarak iyi bir şekilde belgelenmiştir. Erken pasaj hMSC'ler, özel bir kriyomedya kullanılarak kriyoprezervasyon edilir ve Trypan Blue boya dışlama testi ile doğrulandığı üzere, çözülme sonrası canlılık en az %92 ila %95 arasında tutulur. Her kriyovial, hücre materyali bağışı için bilgilendirilmiş onam veren sağlıklı donörlerden toplanan 1 x 106 hücre içerir.

Yağ dokusundan elde edilen hMSC'ler güçlü kendini yenileme kapasitesine sahiptir ve farklılaşma potansiyellerini kaybetmeden in vitro olarak geniş çapta çoğaltılabilirler. Bu hücreler, tanımlanabilirlik, saflık, potansiyel, canlılık ve amaçlanan in vitro araştırma uygulamaları için uygunluklarını sağlamak üzere sıkı kalite kontrol testlerinden geçirilir. Çok potansiyelli olmaları, immünomodülatör etkileri ve parakrin sinyal verme yetenekleri nedeniyle, yağ dokusundan elde edilen hMSC'ler, ilaç taraması, hastalık modellemesi ve kök hücre farklılaşmasının altında yatan mekanizmaların anlaşılması dahil olmak üzere çeşitli araştırma uygulamalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Ancak, bu hücrelerin terapötik veya in vivo uygulamalar için tasarlanmadığını belirtmek önemlidir.

Yağ dokusundan elde edilen hMSC'leri kemik iliği veya göbek kordonu gibi diğer dokulardan elde edilen hMSC'lerden ayıran özellik, daha yüksek proliferasyon hızları ve daha fazla adipojenik farklılaşma kapasitesidir. Bu hücreler ayrıca, kısmen antiinflamatuar yanıtlarda rol oynayan sitokinlerin ve büyüme faktörlerinin daha yüksek ekspresyonunu içeren benzersiz sekretom profilleri nedeniyle daha belirgin bir immünomodülatör etki sergilerler. Ayrıca, yağ dokusundan elde edilen hMSC'ler, kemik iliğinden elde edilen hMSC'lere kıyasla daha kolay elde edilebilir ve izolasyon için daha az invaziv prosedürler gerektirir, bu da onları birçok araştırmacı için tercih edilen bir seçenek haline getirir. Ayırt edici özellikleri, yağ dokusundan elde edilen hMSC'leri metabolik bozukluklar, bağışıklık düzenleme ve rejeneratif tıp üzerine odaklanan çalışmalar için özellikle uygun hale getirir.

Doku
Yağ Dokusu
Uygulamalar
İlaç testleri, rejeneratif tıp, hastalık araştırmaları

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Belirtilmemiş
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
En az 5 pasaj boyunca iyi yayılmış iğ şeklinde, fibroblast benzeri morfoloji. Her pasajda %2'den az sayıda hücre spontan miyofibroblast benzeri morfoloji sergiler.
Hücre türü
Kök hücre

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
İnsan Mezenkimal Kök Hücreleri, Adipoz Doku (Cytion katalog numarası 300645)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
CD73/CD90/CD105 (pozitif) ve CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negatif) dahil olmak üzere kapsamlı bir belirteç paneli, kriyoprezervasyon öncesinde kültüre edilmiş MSC'leri (P2-P3) tanımlamak için akış sitometrisi analizinde kullanılır. Bu belirteçler ISCT MSC komitesi tarafından önerilmektedir.
Virüsler
Donör HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) ve HIV-1/2 (IFA) açısından negatiftir. Hücreler HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum ve Ureaplasma parvum açısından negatiftir.

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Alfa MEM, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w/o: Ribonükleozitler, w/o: Deoksiribonükleozitler, w: 1.0 mM Sodyum piruvat, w: 2.2g/L NaHCO3
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS, 2 ng/mL bFGF ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Tripsin-EDTA
Alt kültür oluşturma
Rutin yapışık hücre kültürü için: Yapışık hücrelerden eski kültür ortamını aspire edin ve kalan ortamı çıkarmak için PBS ile yıkayın. PBS'yi aspire ettikten sonra kültür kabı boyutuna göre uygun hacimde Tripsin/EDTA solüsyonu ekleyin (örn. T25 şişesi için 1 ml, T75 şişesi için 3 ml) ve hücreler ayrılana kadar (5-10 dakika) oda sıcaklığında veya 37°C'de inkübe edin. Mikroskop altında ayrılmayı izleyin ve gerekirse hücreleri serbest bırakmak için kaba hafifçe vurun. Hücreler ayrıldıktan sonra Tripsin/EDTA'yı inaktive etmek için tam ortam ekleyin, hücreleri nazikçe yeniden süspanse edin ve hücre süspansiyonunun bir alikotunu taze ortam içeren yeni bir kültür kabına aktarın. Kabı %5CO2 ile 37°C'ye ayarlanmış bir inkübatöre yerleştirin ve ortamı 2-3 günde bir değiştirin.
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
İlk sıvı yenilemesi 24 saat sonra, daha sonra her 2 ila 3 günde bir.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, canlılığı korumak için %80 FBS + %10 bazal ortam + %10 DMSO veya üstün kriyoproteksiyon için CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz ve pluripotensi korurken istenmeyen farklılaşmayı önlüyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Lütfen bilgi alın
Etnik köken
Kafkas