İçeriğe atla
Human Mesenchymal Stem Cells, Bone Marrow (HMSC-BM)
Doku
Kemik İliği

Human Mesenchymal Stem Cells, Bone Marrow (HMSC-BM)

Cell line · Ürün numarası 300665

Human Mesenchymal Stem Cells derived from Bone Marrow (HMSC-BM) represent a robust and versatile tool for in vitro research. These multipotent mesenchymal...

€690.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Kemik iliğinden elde edilen insan mezenkimal kök hücreleri (HMSC-BM), in vitro araştırmalar için sağlam ve çok yönlü bir araçtır. Bu multipotent mezenkimal stromal hücreler (MSC'ler), kendini yenileme ve adipositler, osteoblastlar ve kondrositler dahil olmak üzere geniş bir yelpazedeki hücre tiplerine farklılaşma konusunda benzersiz bir yeteneğe sahiptir. HMSC-BM'nin bu üç ana hücre dizisine farklılaşma potansiyeli iyi belgelenmiştir, bu da onları rejeneratif tıp, doku mühendisliği ve hücresel farklılaşma yollarına odaklanan çalışmalar için çok değerli kılmaktadır. Bu MSC'ler, çok potansiyelli olmalarını ve çözüldükten sonra yüksek canlılıklarını garanti eden sıkı koşullar altında yetiştirilir.

HMSC-BM'nin yağ dokusu veya göbek kordonu gibi diğer kaynaklardan elde edilen MSC'lere kıyasla ayırt edici özelliklerinden biri, osteojenik farklılaşma konusunda üstün kapasitesidir. Bu, kemik oluşumu ve onarımını yöneten moleküler mekanizmaların anlaşılmasının çok önemli olduğu kemik biyolojisi ve ortopedi araştırmalarında özellikle yararlı olmalarını sağlar. Ek olarak, HMSC-BM güçlü bir immünomodülatör profil sergiler, bu da onları bağışıklık etkileşimlerini ve enflamatuar yanıtları incelemek için mükemmel bir model haline getirir. Bu benzersiz özellikler, HMSC-BM'yi kemik iliği mikroçevresini, hematopoez ve kemik iliği ile ilgili hastalıkların patofizyolojisini araştıran preklinik çalışmalar için tercih edilen bir seçenek haline getirir.

HMSC-BM'nin her bir kriyoviyali, Trypan Blue boya dışlama testi ile belirlenen %92 ila %95 arasında değişen canlılık oranlarına sahip en az 1 x 106 hücre içerir. Bu hücreler, tümü bilgilendirilmiş onam vermiş sağlıklı yetişkin donörlerden alınan kemik iliğinden elde edilir. En yüksek standartları sağlamak için, her parti, hücre tanımlama, saflık, potens ve canlılık değerlendirmek için sıkı kalite kontrol testlerinden geçirilir. Bu kapsamlı testler, MSC'lerin sıkı kriterleri karşıladığını garanti eder ve onları hücre biyolojisi çalışmaları, ilaç keşfi ve farklı uyaranlara hücresel tepkilerin araştırılması dahil olmak üzere çok çeşitli araştırma uygulamaları için uygun hale getirir. Bu hücreler terapötik veya in vivo uygulamalar için tasarlanmamıştır ve kullanımları kontrollü laboratuvar ortamında araştırma amaçlarıyla sınırlıdır.

Doku
Kemik İliği
Uygulamalar
İlaç testleri, rejeneratif tıp, hastalık araştırmaları

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Belirtilmemiş
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
En az 5 pasaj boyunca iyi yayılmış iğ şeklinde, fibroblast benzeri morfoloji. Her pasajda %2'den az sayıda hücre spontan miyofibroblast benzeri morfoloji sergiler.
Hücre türü
Kök hücre

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
İnsan Mezenkimal Kök Hücreleri, Kemik İliği (HMSC-BM) (Cytion katalog numarası 300665)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
CD73/CD90/CD105 (pozitif) ve CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negatif) dahil olmak üzere kapsamlı bir belirteç paneli, kriyoprezervasyon öncesinde kültüre edilmiş MSC'leri (P2-P3) tanımlamak için akış sitometrisi analizinde kullanılır. Bu belirteçler ISCT MSC komitesi tarafından önerilmektedir.
Virüsler
Donör HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) ve HIV-1/2 (IFA) açısından negatiftir. Hücreler HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum ve Ureaplasma parvum açısından negatiftir.

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Alfa MEM, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w/o: Ribonükleozitler, w/o: Deoksiribonükleozitler, w: 1.0 mM Sodyum piruvat, w: 2.2g/L NaHCO3
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS, 2 ng/mL bFGF ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Tripsin-EDTA
Alt kültür oluşturma
Rutin yapışık hücre kültürü için: Yapışık hücrelerden eski kültür ortamını aspire edin ve kalan ortamı çıkarmak için PBS ile yıkayın. PBS'yi aspire ettikten sonra kültür kabı boyutuna göre uygun hacimde Tripsin/EDTA solüsyonu ekleyin (örn. T25 şişesi için 1 ml, T75 şişesi için 3 ml) ve hücreler ayrılana kadar (5-10 dakika) oda sıcaklığında veya 37°C'de inkübe edin. Mikroskop altında ayrılmayı izleyin ve gerekirse hücreleri serbest bırakmak için kaba hafifçe vurun. Hücreler ayrıldıktan sonra Tripsin/EDTA'yı inaktive etmek için tam ortam ekleyin, hücreleri nazikçe yeniden süspanse edin ve hücre süspansiyonunun bir alikotunu taze ortam içeren yeni bir kültür kabına aktarın. Kabı %5CO2 ile 37°C'ye ayarlanmış bir inkübatöre yerleştirin ve ortamı 2-3 günde bir değiştirin.
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
İlk sıvı yenilemesi 24 saat sonra, daha sonra her 2 ila 3 günde bir.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, canlılığı korumak için %80 FBS + %10 bazal ortam + %10 DMSO veya üstün kriyoproteksiyon için CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz ve pluripotensi korurken istenmeyen farklılaşmayı önlüyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Lütfen bilgi alın
Etnik köken
Kafkas