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Human Mesenchymal Stem Cells, Bone Marrow (HMSC-BM)
ティッシュ
骨髄

Human Mesenchymal Stem Cells, Bone Marrow (HMSC-BM)

Cell line · 製品番号 300665

Human Mesenchymal Stem Cells derived from Bone Marrow (HMSC-BM) represent a robust and versatile tool for in vitro research. These multipotent mesenchymal...

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01概要

説明

骨髄由来ヒト間葉系幹細胞(HMSC-BM)は、in vitro研究における強力かつ汎用性の高いツールである。これらの多能性間葉系幹細胞(MSC)は、自己再生能と脂肪細胞、骨芽細胞、軟骨細胞を含む広範な細胞タイプへの分化能という特異的な能力を有する。 HMSC-BMがこれら3つの主要な細胞系へ分化する可能性は十分に実証されており、再生医療、組織工学、細胞分化経路に焦点を当てた研究において極めて貴重な存在となっています。これらのMSCは厳格な条件下で培養され、解凍後の多能性と高い生存率が保証されています。

脂肪組織や臍帯由来MSCと比較したHMSC-BMの顕著な特徴の一つは、骨形成分化能が優れている点である。この特性により、骨形成・修復を制御する分子メカニズムの解明が重要な骨生物学や整形外科研究において特に有用である。 さらに、HMSC-BMは強力な免疫調節プロファイルを示し、免疫相互作用や炎症反応の研究に優れたモデルとなります。これらの特異的特性により、HMSC-BMは骨髄微小環境、造血、骨髄関連疾患の病態生理を探る前臨床研究において優先的に選択される細胞となっています。

各HMSC-BMクライオバイアルには、トリパンブルー染色法による生存率92~95%の細胞が最低1×10⁶個含有されています。これらの細胞は、インフォームドコンセントを得た健康な成人ドナーから採取した骨髄由来です。 最高水準を確保するため、各バッチは細胞同定、純度、効力、生存率を評価する厳格な品質管理試験を実施しています。この徹底的な試験により、MSCが厳格な基準を満たし、細胞生物学研究、創薬、様々な刺激に対する細胞応答の調査など、幅広い研究用途に適していることが保証されます。これらの細胞は治療目的や生体内での使用を意図したものではなく、管理された実験室環境における研究目的に限定して使用されます。

ティッシュ
骨髄
用途
薬物検査、再生医療、疾病研究

02分類

生物
人間
セックス
未指定
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
少なくとも5継代以内は、よく広がった紡錘形の線維芽細胞様形態を示す。各継代で自発的に筋線維芽細胞様の形態を示す細胞は2%以下である。
細胞の種類
幹細胞

04識別子

引用
ヒト間葉系幹細胞、骨髄(HMSC-BM) (Cytion カタログ番号 300665)
NCBI 納税者番号
9606

05発現と感受性

抗原発現
CD73/CD90/CD105(陽性)およびCD14/CD34/CD45/HLA-DR(陰性)を含む包括的なマーカーパネルをフローサイトメトリー分析に使用し、凍結保存前の培養MSC(P2~P3)を同定する。これらのマーカーはISCT MSC委員会によって推奨されている。
ウイルス
ドナーはHBV(PCR)、Treponema pallidum(PCR)、HIV-1/2(IFA)陰性。 細胞はHBV、HCV、HSV1、HSV2、CMV、EBV、HHV6、Toxoplasma gondii、Treponema pallidum、Chlamydia trachomatis、Ureaplasma urealyticum、Ureaplasma parvum陰性。

06取り扱いと飼育

培地
αMEM、w: 2.0mM安定グルタミン、w/o:リボヌクレオシド、w/o:デオキシリボヌクレオシド, w: 1.0 mM ピルビン酸ナトリウム, w: 2.2g/L NaHCO3
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBS、2 ng/mL bFGFを添加する。
解離試薬
トリプシン-EDTA
継代培養
通常の接着細胞培養の場合:付着細胞から古い培地を吸引し、PBSで洗浄して残存培地を除去する。PBSを吸引した後、培養容器のサイズに応じて適切な量のTrypsin/EDTA溶液を加え(例えば、T25フラスコなら1ml、T75フラスコなら3ml)、細胞が剥離するまで(5~10分)室温または37℃でインキュベートする。顕微鏡で剥離を観察し、必要に応じて容器を軽くたたいて細胞を離す。いったん剥離したら、完全培地を加えてTrypsin/EDTAを失活させ、細胞を静かに再懸濁し、細胞懸濁液のアリコートを新しい培地の入った新しい培養容器に移す。容器を37℃、5%CO2に設定したインキュベーターに入れ、2~3日ごとに培地を交換する。
播種密度
1~3×10⁴細胞/cm²
流体の更新
最初の水分補給は24時間後、その後は2~3日おきに行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、生存率を維持するために80%FBS+10%基礎培地+10%DMSO、あるいは、多能性を維持しながら不要な分化を防ぎ、優れた凍結保護を行うためにCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用する。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
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民族
白人