Pereiti prie turinio
Human Mesenchymal Stem Cells, Bone Marrow (HMSC-BM)
Audinys
Kaulų čiulpai

Dokumentai

Human Mesenchymal Stem Cells, Bone Marrow (HMSC-BM)

Cell line · Prekės numeris 300665

Human Mesenchymal Stem Cells derived from Bone Marrow (HMSC-BM) represent a robust and versatile tool for in vitro research. These multipotent mesenchymal...

€690.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Iš kaulų čiulpų gautos žmogaus mezenchiminės kamieninės ląstelės (HMSC-BM) yra patikimas ir universalus įrankis in vitro tyrimams. Šios daugiafunkcinės mezenchiminės stromos ląstelės (MSC) turi unikalią savybę atsinaujinti ir diferencijuotis į įvairių tipų ląsteles, įskaitant adipocitus, osteoblastus ir chondrocitus. HMSC-BM potencialas diferencijuotis į šias tris pagrindines linijas yra gerai dokumentuotas, todėl jos yra neįkainojamos tyrimams, orientuotiems į regeneracinę mediciną, audinių inžineriją ir ląstelių diferenciacijos kelius. Šios MSC yra auginamos griežtomis sąlygomis, užtikrinančiomis jų multipotentiškumą ir aukštą gyvybingumą po atšildymo.

Viena iš HMSC-BM išskirtinių savybių, palyginti su MSC, gautomis iš kitų šaltinių, pvz., riebalinio audinio ar virkštelės, yra jų pranašumas osteogeninės diferenciacijos srityje. Tai jas daro ypač naudingas kaulų biologijos ir ortopedijos tyrimuose, kur labai svarbu suprasti kaulų formavimąsi ir atsinaujinimą reguliuojančius molekulinės mechanizmus. Be to, HMSC-BM pasižymi stipriu imunomoduliuojančiu profiliu, todėl jos yra puikus modelis imuninių sąveikų ir uždegiminių reakcijų tyrimams. Dėl šių unikalių savybių HMSC-BM yra pirmasis pasirinkimas ikiklinikiniams tyrimams, kuriuose tiriamas kaulų čiulpų mikroaplinka, hematopoezė ir kaulų čiulpų ligų patofiziologija.

Kiekvienoje HMSC-BM krioviale yra ne mažiau kaip 1 x 106 ląstelių, kurių gyvybingumas, nustatytas pagal Trypan Blue dažo išskyrimo testą, svyruoja nuo 92 % iki 95 %. Šios ląstelės yra gautos iš kaulų čiulpų, paimtų iš sveikų suaugusių donorų, kurie visi davė informuotą sutikimą. Siekiant užtikrinti aukščiausius standartus, kiekviena partija yra griežtai tikrinama, siekiant įvertinti ląstelių identifikavimą, grynumą, stiprumą ir gyvybingumą. Šie išsamūs tyrimai garantuoja, kad MSC atitinka griežtus kriterijus, todėl jos tinka įvairiems moksliniams tyrimams, įskaitant ląstelių biologijos tyrimus, vaistų atradimus ir ląstelių reakcijų į įvairius dirgiklius tyrimus. Šios ląstelės nėra skirtos terapiniam ar in vivo naudojimui, jos gali būti naudojamos tik moksliniams tyrimams kontroliuojamoje laboratorinėje aplinkoje.

Audinys
Kaulų čiulpai
Paraiškos
Vaistų tyrimai, regeneracinė medicina, ligų tyrimai

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Nenurodyta
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Gerai išsidėsčiusi verpstės formos, į fibroblastus panaši morfologija bent per 5 ištraukas. Mažiau nei 2 % ląstelių pasižymi spontaniška į miofibroblastus panašia morfologija per kiekvieną perėjimą.
Ląstelių tipas
Kamieninės ląstelės

04Identifikatoriai

Nuoroda
Žmogaus mezenchiminės kamieninės ląstelės, kaulų čiulpai (HMSC-BM) (Cytion katalogo numeris 300665)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
Prieš kriokonservavimą kultivuotiems MSC (P2-P3) identifikuoti naudojama išsami žymenų grupė, įskaitant CD73/CD90/CD105 (teigiami) ir CD14/CD34/CD45/HLA-DR (neigiami). Šiuos žymenis rekomenduoja ISCT MSC komitetas.
Virusai
Donoras yra neigiamas dėl HBV (PGR), Treponema pallidum (PGR) ir ŽIV-1/2 (IFA). Ląstelės yra neigiamos dėl HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum ir Ureaplasma parvum.

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Alfa MEM, w: 2,0 mM stabilus glutaminas, w/o: Ribonukleozidai, w/o: Deoksiribonukleozidai, w: 1,0 mM natrio piruvatas, w: 2,2 g/l NaHCO3
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS, 2 ng/ml bFGF
Disociacijos reagentas
Trypsino ir EDTA
Subkultūrinis auginimas
Įprastinėms adherentinėms ląstelių kultūroms: Kad pašalintumėte visą likusią terpę, iš adherentinių ląstelių išsiurbkite seną terpę ir nuplaukite jas PBS. Išsiurbę PBS, įpilkite reikiamą kiekį tripsino ir EDTA tirpalo, atsižvelgiant į kultūros indo dydį (pvz., 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai), ir inkubuokite kambario arba 37 °C temperatūroje, kol ląstelės atsiskirs (5-10 min.). Stebėkite atsiskyrimą per mikroskopą ir, jei reikia, švelniai palieskite indą, kad ląstelės išsilaisvintų. Kai ląstelės atsiskiria, įpilkite pilną terpę, kad būtų inaktyvuotas tripsinas/EDTA, atsargiai reuspenduokite ląsteles ir perkelkite alikvotą ląstelių suspensijos į naują auginimo indą su šviežia terpe. Įstatykite indą į inkubatorių, kuriame nustatyta 37 °C temperatūra ir 5 %CO2, o terpę keiskite kas 2-3 dienas.
Sėjos tankis
1–3 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
Pirmą kartą skysčiai atnaujinami po 24 valandų, vėliau - kas 2-3 dienas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame 80 % FBS + 10 % bazinę terpę + 10 % DMSO gyvybingumui palaikyti arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kuri užtikrina geresnę kriokonservavimo apsaugą, apsaugo nuo nepageidaujamos diferenciacijos ir kartu išsaugo pluripotenciją.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Prašome teirautis
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių