Pereiti prie turinio
Human Gingival Fibroblasts (hGF)
Audinys
Dantenos
Sinonimai
HGF, HFIB-G, Human fibroblasts, gingiva, provitro 1210412

Dokumentai

Human Gingival Fibroblasts (hGF)

Primary cell · Prekės numeris 300703

Oral fibroblasts for periodontal and dental research

€650.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Pagaminta pagal užsakymą
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Žmogaus dantenų fibroblastai (hGF) yra pirminės ląstelės, gaunamos iš burnos ertmės dantenų jungiamojo audinio. Šie fibroblastai atlieka svarbų vaidmenį palaikant dantenų audinio struktūrinį vientisumą, gamindami ekstraląstelinio matrikso komponentus, įskaitant kolageną, elastiną ir glikozaminoglikanus. Jų gebėjimas daugintis ir migruoti yra būtinas žaizdų gijimui, audinių atstatymui ir atsakui į periodonto ligas. Be struktūrinių funkcijų, hGF dalyvauja dantenų uždegiminėse reakcijose, sąveikauja su įvairiomis imuninėmis ląstelėmis ir tarpininkauja išsiskiriant citokinams bei augimo veiksniams. Dėl to jos yra pagrindinis ląstelių modelis burnos sveikatai, periodonto ligoms ir audinių regeneracijai tirti.

hGF ląstelės plačiai naudojamos burnos biologijos tyrimuose, ypač siekiant suprasti periodonto ligų patofiziologiją, kur labai svarbi fibroblastų ir patogeninių bakterijų, tokių kaip *Porphyromonas gingivalis*, sąveika. Šios ląstelės taip pat naudojamos audinių inžinerijoje ir regeneracinėje medicinoje, ypač kuriant dantenų ir periodonto defektų gydymo būdus. Jų reakcija į įvairias biomedžiagas, augimo veiksnius ir ekstraląstelinio matrikso komponentus dažnai tiriama siekiant optimizuoti audinių atkūrimo ir regeneracijos sąlygas burnos chirurgijoje ir dantų implantavimo srityje.

Audinys
Dantenos
Paraiškos
Audinių regeneracija, Žaizdų gijimo tyrimai
Sinonimai
  • HGF
  • HFIB-G
  • Human fibroblasts
  • gingiva
  • provitro 1210412

02Donoras

Donoro amžius
Lot-specific (see CoA)
Etninė priklausomybė
Lot-specific (see CoA)

03Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Priklausantis nuo partijos
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

04Charakteristikos

Morfologija
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Ląstelių tipas
Fibroblastai
Tumorogeninis
No

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS, 10 ng/ml bFGF, 10 mikrogramų/l insulino
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
More than 4,000 cells/cm²
Skysčių atnaujinimas
24 hours after seeding, then every 48 to 72 hours
Atkūrimas po atšilimo

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Atšildymas ir auginimas
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame 90 % FBS + 10 % DMSO gyvybingumui palaikyti arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurios sudėtyje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Identifikatoriai

Nuoroda
Žmogaus dantenų fibroblastai (hGF) (Cytion katalogo numeris 300703)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606